Mécanismes inflammatoires induits par les cellules endothéliales dans la maladie veineuse thromboembolique : inflammation et thrombose veineuse

Inflammatory mechanisms induced by endothelial cell activation in venous thromboembolism

• Auteur / Autrice : Maria Najem
• Direction : Francis Couturaud, Catherine Lemarie
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie, physiopathologie, biologie systémique médicale
• Date : Soutenance le 01/12/2022
• Etablissement(s) : Brest
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé (Nantes)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Groupe d'étude de la thrombose de Bretagne occidentale (Brest, Finistère)
• Jury : Président / Présidente : Pierre-Emmanuel Morange
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Francis Couturaud, Catherine Lemarie, Pierre-Emmanuel Morange, Aurélie Leroyer, Christophe Guignabert, Delphine Borgel
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Aurélie Leroyer, Christophe Guignabert

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules endothéliales

Maladie thromboembolique veineuse

Mots clés libres

MVTE

Inflammation

Endothélium

TLR3

ARNe

Neutrophiles

VTE

Inflammation

Endothelium

TLR3

ERNA

Neutrophils

Résumé

La maladie veineuse thromboembolique (MVTE) représente la troisième cause de mortalité cardiovasculaire. Au cours de la formation du thrombus veineux, des DAMPs (damage-associated molecular patterns) activent le système immunitaire inné en interagissant avec les PRRs (pattern recognition receptors). Parmi ces DAMPs, le rôle des ARN extracellulaires (ARNe) et de leur récepteur présumé TLR3 dans la thrombogenèse, reste inconnu. Mon travail vise à élucider le rôle prothrombotique de l’axe ARNe/TLR3 et la contribution du système immunitaire adaptatif aux complications chroniques de la MVTE. J’ai montré que les ARNe augmentent la taille du thrombus et le recrutement des neutrophiles chez les souris contrôles, et non pas chez celles déficientes enTLR3 (TLR3-/-). En effet, le TLR3 endothélial coordonne le recrutement des neutrophiles via la sécrétion d’IL-8 ou de l’homologue murin, CXCL5. J’ai constaté que les ARNe augmentent la phosphorylation de NF-κB et l’expression d’IFNβ,uniquement dans les cellules HEK293T surexprimant le TLR3. Les ARNe participent également à la MVTE en amplifiant la coagulation via la réduction du TFPI (Tissue factor pathway inhibitor). Enfin, le TLR3 et l’immunité innée contribueraient aux complications chroniques de la MVTE en activant les réponses immunitaires des cellules B et T. En conclusion, mon travail fournit une preuve de concept que l’axe ARNe/TLR3 exerce des effets prothrombotiques dans la MVTE et pourrait également conduire à ses complications chroniques. Ainsi, la dégradation des ARNe et l’inhibition du TLR3 pourraient ouvrir la voie au développement de nouvelles approches thérapeutiques adjuvantes.

Venous thromboembolism (VTE) is the third leading cause of mortality among cardiovascular diseases. During thrombusformation, endogenous host-derived molecules, termed damage-associated molecular patterns(DAMPs), activate the innate immune system by interacting with PRRs (pattern recognitionreceptors). Among DAMPs, the role of extracellularRNA (eRNA) and their presumed receptor TLR3 in thrombogenesis, has not yet been elucidated. My work aims at deciphering the prothrombotic mechanisms of the eRNA/TLR3 axis and at identifying the contribution of the adaptive immune system to chronic VTE complications. I demonstrated that eRNA increase thrombus size and neutrophil recruitment in wild-type (WT), but not in TLR3 deficient (TLR3-/-) mice. Hence, endothelial TLR3 coordinates neutrophil recruitment through IL-8 secretion or its murine homologue, CXCL5. I found that eRNAupregulate NF-κB phosphorylation and IFNβexpression, only in HEK293T cells overexpressingTLR3. In addition to promoting neutrophil recruitment, eRNA participate in VTE by enhancing coagulation through TFPI (Tissuefactor pathway inhibitor) down regulation. Finally, I showed that TLR3 and other components of the innate immunity might contribute to VTE chronic complications by activating B and T cell immune responses. In conclusion, my research work provides a proof of concept that eRNA/TLR3 axis exerts prothrombotic effects in VTE and might also lead to its chronic complications. Thus, RNAdegradation and TLR3 inhibition could pave the way for the development of novel adjuvant therapeutic approaches.