Caractérisation biophysique du repliement dépendant du calcium des motifs RTX de la toxine adényl cyclase de Bordetella pertussis
Auteur / Autrice : | Ana Cristina Sotomayor Perez |
Direction : | Alexandre Chenal, Daniel Ladant |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Structure, fonction et ingéniérie des protéinesChimie des surfaces et interfaces |
Date : | Soutenance en 2010 |
Etablissement(s) : | Paris 7 en cotutelle avec Université de Carthage (Tunisie) |
Partenaire(s) de recherche : | autre partenaire : Faculté des sciences de Bizerte (Tunisie) |
Résumé
Les motifs RTX (Repeat in ToXin) sont des séquences répétées caractéristiques d'une large famille de toxines bactériennes. La liaison du calcium aux motifs RTX induit la formation d'un type particulier de structure, appelée «β-roll ». La toxine adénylcyclase (CyaA) produite par Bordetella pertussis, l'agent de la coqueluche, est une des toxines RTX la mieux caractérisée. CyaA possède une partie C-terminale impliquée dans la liaison au récepteur cellulaire eucaryote (domaine R). R est constitué d'une quarantaine de motifs RTX organisés en cinq régions consécutives, appelées blocs I à V, séparées par des régions flanquantes non-RTX. Il a été précédemment montré que le bloc V avec ses régions flanquantes N- et C- terminales constitue un domaine autonome nécessaire pour la toxicité de CyaA. Lors de ces rencontres doctorales, nous présentons une étude biophysique qui a pour objectif d'identifier et de caractériser la contribution des régions flanquantes au processus de repliement du bloc V. Nos résultats indiquent que les motifs RTX, en absence de calcium, présentent les caractéristiques des protéines intrinsèquement désordonnées. Nous montrons que la région flanquante C-terminale est essentielle au repliement dépendant du calcium du bloc V. Par contre, la région N-terminale n'est pas nécessaire. Enfin, les structures secondaire et tertiaire se forment simultanément lors de la liaison coopérative de plusieurs ions calcium. Ce résultat suggère que le repliement du blocV est un processus à deux états: un état désordonné en absence du calcium tandis que la liaison du calcium aboutit à un état structuré et compact. Ces résultats ont un impact direct pour la sécrétion de la toxine