Identification and functional analysis of proteins which are ubiquitinated and/or proteolysed during the first embryonic M-Phase in Xenopus laevis

Recherche et étude de fonction de protéines ubiquitinées et / ou dégradées pendant la première mitose embryonnaire chez Xenopus laevis

• Auteur / Autrice : Franck Bazile
• Direction : Jacek Z. Kubiak
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Rennes 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéasome

Ubiquitine

Mitose

Xénopes

Résumé

Le déroulement de la division cellulaire nécessite la dégradation séquentielle de protéines par la voie « ubiquitine/protéasome ». L’objectif majeur de ce travail était de caractériser de nouvelles protéines polyubiquitinées et dégradées en fin de mitose au cours de la première division embryonnaire chez Xenopus laevis. Après avoir caractérisé le mécanisme moléculaire de l’inactivation du MPF mitotique, deux cribles protéomiques complémentaires, ciblés sur la recherche de nouvelles protéines ubiquitinées et/ou dégradées par le protéasome, ont été réalisés. 143 protéines ont été identifiées dans le premier crible et 6 dans le second. L’analyse fonctionnelle d’une de ces 6 protéines, TCTP, démontre que (i) elle pourrait être le substrat de protéolyse partielle, ii) c’est une protéine de la matrice du fuseau mitotique qui n’est pas associée aux microtubules, iii) elle est associée avec certaines structures d’actine. L’analyse d’autres protéines du crible est en cours au laboratoire.

Cell division requires sequential proteolysis of regulatory proteins which is mediated by the ubiquitin-proteasome pathway. The main goal of the present study was to characterize novel mitotic actors that are polyubiquitinated and degraded upon mitotic exit during the first embryonic cell cycle in Xenopus laevis. Besides unraveling molecular mechanisms involved in MPF inactivation upon M-Phase exit, we performed two complementary proteomic screens to search for novel proteins ubiquitinated and/or degraded by the proteasome in cell-free mitotic extract. 143 proteins were identified in the first screen, 6 in the second. Among them, TCTP was further characterized and was shown to be (i) only partially degraded upon mitotic exit, (ii) a part of the mitotic spindle matrix without directly interacting with microtubules and (iii) associated with certain structures of actin cytosqueleton in somactic cells. Functional analysis of other identified proteins of interest is currently in progress.