Études structurales sur les sous-unités t60/t91 du facteur de transcription IIIC (TFIIIC) de la levure

Structural studies on subunits t60/t91 of yeast transcription factor IIIC (TFIIIC)

• Auteur / Autrice : Anastasia Mylona
• Direction : Christoph W. Müller
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Grenoble 1

Résumé

TFIIIC est un facteur de transcription de classe III qui se lie spécifiquement et de façon stable sur les boîtes A et B des promoteurs des gènes de l'ARNt. TFIIIC est composé de 6 sous-unités : t138, t131, t95, t91, t60 et t55. Ce travail présente la structure du complexe entre t60 et la partie C-terminale de t91 (∆t9l) qui a été résolue à 3. 2 Å. La structure comporte trois régions : a) ∆t91 qui est un β-propeller ; b) une partie N-terminale de t60 qui est aussi un p-propeller et qui se trouve entre ∆t91 ; et c) le domaine C-terminal de t60, qui a un nouveau rempliement. L'interaction entre ∆t91 et t60 est formée par les deux β-propellers et la partie C-terminale de t60 est complètement indépendante. Cette nouvelle interaction β-propeller - β-propeller apparaît importante pour l'assemblage d'un complexe tB stable, capable de se fixer à l'ADN. Nos résultats donnent des informations sur le mécanisme d'assemblage du complexe tB et sa liaison à l'ADN.

TFIIIC is a DNA binding complex that serves as an assembly factor in class III genes. It is a multisubunit protein of about 600 kDa organized in two large domains, tA and tB, of similar size and mass. TFIIIC consists of six polypeptides t138, t131, t95, t91, t60 and t55. T138, t91 and t60 make up the tB subcomplex and t131, t95 and t55 belong to the tA subassembly. This work presents the X-ray crystal structure of yeast t60 complexed with the C-terminal part of t91 at 3. 2 Å resolution. T60 consists of a N-terminal β-propeller domain and a C-terminal domain that is an overall new fold and very likely is the part that links tA with tB and contacts the TBP. ∆t91 is also a β-propeller. The interacting region between the two proteins involves residues in the two β-propellers, whereas the C-terminal domain of t60 does not contribute at all to the interaction. This novel β-propeller β-propeller interaction appears to be of great importance for the formation of a very stable tB cornplex able to bind with high affinity and stability to the B box. Our results provide a starting point for further structural and functional studies aimed at elucidating the mechanism of preinitiation complex formation in the RNA po]ymerase III transcription machinery.