L'apoptose induite par fas et sa modulation par des co-récepteurs membranaires

• Auteur / Autrice : Patrick Legembre
• Direction : Jean-Luc Taupin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et médicales. Biologie - Santé
• Date : Soutenance en 2002
• Etablissement(s) : Bordeaux 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lymphocytes -- Activation

Antigènes CD95

Apoptose

Résumé

Le Fas (CD95/Apo1) est un récepteur membranaire appartenant à la superfamille du récepteur au TNF (tumor necrosis factor). Le ligand naturel FasL ou les anticorps agonistes agrègent ce récepteur et déclenchent un signal de mort par apoptose. Le Fas possède dans sa région intracellulaire un domaine de mort indispensable au signal apoptotique. Dans le but d'obtenir un mutant dominant négatif, la région extracellulaire du Fas a été fusionnée avec une séquence d'ancrage membranaire GPI (glycosylphosphatidylinositol). Ce Fas-GPI, transfecté dans des lignées lymphomateuses T exprimant du Fas endogène, n'inhibait pas le signal apoptotique mais au contraire l'amplifiait. Le Fas-GPI était localisé dans les microdomaines,. Ces domaines sont des radeaux lipidiques compacts qui flottent dans la membrane cytoplasmique plus fluide. Les microdomaines concentrent des protéines extracellulaires (protéines-GPI), transmembranaires et intracellulaires (protéines de signalisation intracellulaire). Des récepteurs naturels comme le CD28 ou le CD59 localisés aussi dans ces microdomaines induisaient respectivement une amplification ou une inhibition du signal apoptotique Fas et la destruction de ces structures lipidiques par un chélateur de cholestérol (méthyl-β-cyclodextrine) annulait ces signaux modulateurs. Donc le recrutement des microdomaines avec la protéine Fas module son signal apoptotique. De plus nos résultats mettent en évidence une hétérogénéité dans ces microdomaines qui peuvent induire des signaux intracellulaires opposés. Lors de l'activation du Fas par l'anticorps agoniste, il se forme des agrégats Fas résistant au SDS et aux réducteurs de ponts di-sulfures. Nous avons démontré dans nos travaux que ces agrégats n'apparaissaient pas en présence du FasL soluble ou membranaire. De plus la formation de ces agrégats était indépendante du signal apoptotique car des lignées cellulaires résistantes à la mort cellulaire produisaient toujours ces complexes de Fas.