Relation entre le repertoire tcr selectionne par un antigene in vivo et le repertoire pre-immun correspondant

• Auteur / Autrice : VALERIE ATTUIL
• Direction : Janet L. Maryanski
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Lyon, École normale supérieure (sciences)

Résumé

La frequence des precurseurs t specifiques d'un antigene (ag) donne etant basse, il est difficile d'analyser le repertoire pre-immun specifique d'un ag et de determiner sa relation avec le repertoire selectionne au cours d'un reponse immunitaire. Nous avons utilise un systeme dans lequel une population enrichie en cellules selectionnees par l'ag peut etre purifiee par cytometrie. Dans les souris dba/2, les tcr des cellules t cd8 specifiques d'un epitope immunodominant defini (cw3 170-179) ont une structure conservee avec un biais dans l'utilisation des segments de gene tcr vb10 et tcrbj1s2. Les cellules t cd8 activees (cd62l) avec un tcr bv10, selectionnees par l'ag cw3, sont triees pour une analyse par pcr sur cellules individuelles. L'analyse poussee a saturation revele que chaque souris selectionne un repertoire tcr bv10j1s2 propre compose d'au moins 20 clones de frequences variees ou tres peu de clones forment plus de 50% du repertoire. Nous avons voulu savoir si cette distribution refletait la distribution du repertoire pre-immun specifique de l'ag cw3. Pour ce faire, nous avons developpe une approche par transfert de splenocytes d'une souris normale vers 2 souris irradiees. Ces paires de souris sont ensuite immunisees et le repertoire tcr selectionne par l'ag cw3 est analyse. Une a 2 sequences communes ont ete detectees dans chacune des 5 paires analysees. Au contraire, aucune sequence commune n'a ete detectee dans des souris ayant recu des cellules de donneurs differents ou parmi les controles transferes avec des splenocytes issues de donneurs multiples. Ces resultats montrent que certains precurseurs sont deja divises avant immunisation et que la selection par l'ag semble etre surtout liee au hasard parmi le repertoire pre-immun disponible. En appliquant des simulations informatiques a ces donnees, nous avons evalue des modeles decrivant la relation entre le repertoire pre-immun specifique et sa selection pendant la reponse a l'ag cw3.