Etude de mutants de l'arn ribosomal 5s chez la levure saccharomyces cerevisiae

• Auteur / Autrice : Anne-Marie Dechampesme
• Direction : Sylvie Camier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

L'arn ribosomal 5s est un petit arn stable, composant essentiel de la plupart des grandes sous-unites des ribosomes eucaryotes et procaryotes. Chez les eucaryotes les genes d'arnr 5s sont presents, comme les autres adnr, en tres grand nombre de copies, ils sont transcrits par l'arn polymerase iii en presence d'un facteur de transcription specifique, tfiiia. L'objectif initial de ce travail etait d'etudier la synthese de l'arnr 5s chez la levure saccharomyces cerevisiae par la recherche de mutants alteres specifiquement dans cette etape. Pour cela, un systeme artificiel de synthese d'arnr 5s in vivo a ete mis au point, capable d'assurer la survie de cellules dans lesquelles toute synthese endogene d'arnr 5s est interrompue (construction rpr1-5s) ceci nous a permis de montrer que le seul role essentiel du facteur tfiiia chez s. Cerevisiae, est la transcription des adn ribosomaux 5s. Ce travail a ensuite ete poursuivi par la caracterisation de cellules de levure survivant, en l'absence du facteur tfiiia, grace aux arnr 5s artificiels produits a partir de la construction rpr1-5s. Nous avons montre que la presence de ces arnr 5s, produits en quantite limitante, entrainait un defaut specifique dans une etape precise de la synthese de la sous-unite ribosomale 60s : la maturation de l'arn precurseur 27sb. Nous proposons que l'arnr 5s est incorpore dans la pre-sous-unite ribosomale 60s contenant l'arnr 27sb, juste avant la maturation de ce precurseur. L'incorporation de l'arnr 5s a cette etape precise pourrait permettre d'assurer pour chaque sous-unite ribosomale 60s la presence en quantite equimolaire des trois arnr. Elle pourrait de plus constituer un point de controle permettant la stabilisation de la pre-sous-unite 60s et la poursuite de sa synthese.