Folliculogenese ovarienne chez la truie (sus scrofa domesticus) : isolement de genes exprimes differentiellement, caracterisation genetique et fonctionnelle

Ovarian folliculogenesis in sow (sus scrofa domesticus) : isolation of differentially expressed genes, genetic and functional characterisation

• Auteur / Autrice : CATHERINE CLOUSCARD
• Direction : FRANCOIS MATEY
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

La folliculogenese ovarienne st un phenomene continu, marque par la succession de differentes etapes du developpement du follicule, depuis le moment ou il sort de la reserve ovarienne jusqu'a sa rupture au moment de l'ovulation ou a son involution par atresie. Le determinisme du developpement folliculaire reste encore imparfaitement compris, notamment la balance entre la croissance et l'atresie, mecanisme qui regule le taux d'ovulation. L'objectif poursuivi par notre groupe est d'identifier les genes importants pour le developpement du follicule ovarien et, en particulier, ceux impliques dans la differenciation de la granulosa. Le laboratoire met en uvre des strategies differentielles car l'expression des genes impliques varie en particulier en fonction du stade de developpement et en reponse a de nombreuses stimulations. L'etude de l'expression de tels genes enrichit la comprehension des mecanismes de differenciation resultant de la modulation de l'expression genique au niveau transcriptionnel. Nous avons utilise une approche globale (la technique de mrna differential display), visant a identifier un grand nombre de messagers differentiellement exprimes sous l'effet de la fsh -regulateur ovarien majeur- dans les cellules de granulosa en culture ainsi que des messagers specifiques de certains stades de developpement folliculaire. La caracterisation fonctionnelle des messagers isoles a permis d'evaluer leur taux d'expression, leur distribution tissulaire, la regulation de leur expression in vitro ainsi que leur specificite d'expression ovarienne (variation du taux de transcrits au cours de la croissance folliculaire et, dans quelques cas, etude spatio-temporelle par hybridation in situ). La plupart des genes ont egalement ete localises sur chromosomes porcins. Cette etude cartographique a pour objectif d'enrichir la carte d'expression du genome porcin ainsi que de mettre en evidence la colonisation de ces genes avec des marqueurs genetiques de prolificite. Les resultats obtenus montrent l'interet de la technique de mrna differential display pour l'etude de situations physiologiques complexes et la recherche de messagers rares et differentiellement exprimes. L'etude de la folliculogenese a permis d'isoler des marqueurs du developpement folliculaire et de correler des donnees d'expression in vitro avec les observations in vivo. Enfin la demarche presentee permet d'acceder a l'etude de l'expression du genome, au niveau transcriptionnel, dans une situation definie (physiologique, pathologique ou experimentale).