Recherche Avancée

Thèse soutenue

Etude des mécanismes transcriptionnels du gène codant pour la proopiomélanocortine dans la lignée humaine de carcinome bronchique à petites cellules DMS-79 : Endocrinologie et intéractions cellulaires

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Auteur / Autrice : Agnès Picon
Direction : Xavier Bertagna
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Endocrinologie et Interactions Cellulaires
Date : Soutenance en 1998
Etablissement(s) : Paris 11
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Groupe d’Etude en Physiopathologie Endocrinienne – UPR CNRS 1524 – Institut Cochin de Génétique Moléculaire
Jury : Président / Présidente : Claude Kordon
Examinateurs / Examinatrices : Xavier Bertagna, Claude Kordon, Jacques Drouin, Michel Raymondjean, Jean-François Savouret, Yves De Keyzer, Xavier Bertagna
Rapporteurs / Rapporteuses : Jacques Drouin, Michel Raymondjean

Résumé

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Nous avons utilisé la lignée cellulaire humaine DMS-79 comme modèle d'étude des cancers bronchiques à petites cellules (SCLC) responsables d'une sécrétion ectopique d'ACTH. L'analyse des mécanismes transcriptionnels du gène codant pour la proopiomélanocortine (POMC) humaine a été effectuée dans DMS-79 et dans la lignée cellulaire hypophysaire AtT-20. Nous avons fonctionnellement montré que dans AtT-20, des séquences promotrices très conservées entre le rat et l'homme suffisent à la transcription du gène POMC. La majorité des interactions démontrées dans le promoteur du gène de rat avec les facteurs transcriptionnels d'AtT-20 sont conservées. C'est le cas de l'interaction avec le facteur NeuroD1, ce qui suggère que le mécanisme d'activation transcriptionnelle est identique dans les deux espèces. Il en est de même pour le facteur Bm3a, mais nos résultats indiquent que ce facteur n'est ni nécessaire, ni suffisant à l'expression du gène POMC. Nous avons défini quatre domaines fonctionnels dans le promoteur du gène POMC humain, dont trois sont actifs dans DMS-79 (Domaines I, II et IV). Cette activité est associée à la présence de facteurs transcriptionnels à distribution non ubiquitaire, car les Domaines II et IV sont inactifs dans la lignée cellulaire HeLa. Quatre sites de liaison pour des facteurs de DMS-79 ont été identifiés. Le site IA a été identifié dans le Domaine I; il lie dans DMS-79 des protéines différentes de celles identifiées dans AtT-20 et HeLa. Les sites IIA et IIB, dans le Domaine II, sont tous deux actifs dans DMS-79. Le site IVA, actif exclusivement dans DMS-79, interagit in vitro avec le facteur E2F. L'activité transactivatrice d'E2F est modulée par interaction avec la protéine du rétinoblastome, pRB, inactive dans la lignée DMS-79 comme dans de nombreux SCLC. Nos résultats suggèrent que l'absence de pRB dans DMS-79 permet l'activation du gène POMC humain par le facteur E2F, en combinaison avec des facteurs transcriptionnels particuliers à cette lignée.