Mise en evidence de l'expression d'une galectine de type 8 dans des cellules de cancer bronchique humain via le clonage de son adn complementaire

Expression of the galectin-8 in human lung cancer cells, by cloning its cdna

• Auteur / Autrice : FRANCK BRICHORY
• Direction : Jean-Paul Le Pennec
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 1997
• Etablissement(s) : Rennes 1

Résumé

Un anticorps monoclonal po66 a ete obtenu apres immunisation de souris balb/c par des cellules provenant d'un carcinome epidermoide bronchique humain. En immunohistochimie, po66 se fixe sur tous les carcinomes epidermoides bronchiques testes et 50% des adenocarcinomes. Dans le present travail, nous avons etudie, par microscopie electronique, la localisation cellulaire de l'antigene sur un modele de spheroides multicellulaires. Nous avons observe que, si dans un premier temps, po66 se fixait sur des debris cellulaires, apres 72 heures d'incubation des spheroides en presence de l'anticorps, ce dernier etait localise dans des structures vacuolaires a l'interieur de cellules morphologiquement intactes. Nos observations suggerent que l'internalisation se produit par un mecanisme de phagocytose, les vesicules formees semblant penetrer progressivement dans les cellules vivantes. Par une etude biochimique, nous avons caracterise trois proteines de 47, 50 et 69 kda immunoprecipitees par po66, supposant l'existence probable de plusieurs antigenes. Par le criblage d'une banque adnc de cancer bronchique, nous avons isole differents clones codant pour une proteine appartenant aux galectines et plus particulierement a celle de type 8. Celle-ci a ete nommee po66-cbp, pour po66-carbohydrate binding protein. Plusieurs membres de cette famille ont ete a ce jour decrits dans divers types de cancers, notamment la galectine-8 dans les carcinomes de la prostate. L'analyse des differents clones, a montre l'existence de plusieurs arnm et d'au moins trois cadres de lecture potentiels dus a la presence de sequences insertionnelles dans certains clones isoles. L'etude de l'expression de po66-cbp dans differents tissus et cellules, sains et tumoraux, a permis de constater des expressions variables des differents transcrits possibles selon le type cellulaire etudie. Plusieurs galectines ont deja ete decrites dans differentes etudes de recherche contre le cancer. Po66-cbp pourrait faire partie de ces molecules impliquees dans certains processus lies a la progression tumorale.