Thèse soutenue

Etude de l'acquisition de la tolerance a la cryoconservation des embryons somatiques de carotte (daucus carota l. )

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Auteur / Autrice : Cécile Thierry
Direction : Vincent Pétiard
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1996
Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

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La congelation dans l'azote liquide d'explants vegetaux capables de redonner des individus entiers, est un moyen de conservation des ressources genetiques. La comprehension des mecanismes fondamentaux conferant la tolerance a un tel stress a ete initiee sur des embryons somatiques de carotte. Un pretraitement des embryons est necessaire pour qu'ils survivent a la congelation, un des plus efficaces etant un pretraitement de 21 heures dans un milieu contenant 0,4 m de saccharose. D'abord, une etude systematique de l'aptitude a la congelation des embryons issus de 34 souches embryogenes monogenotypiques a ete realisee. Aucun effet genetique direct ne semble influer sur cette capacite. Par contre, le potentiel embryogene de la souche pourrait exercer un effet important sur l'aptitude des embryons a tolerer la congelation. Ensuite, une etude des mecanismes de tolerance a la congelation induits par le saccharose a ete entreprise. L'augmentation de la concentration en saccharose dans les cellules ne semble pas determinante: l'utilisation d'inhibiteurs de transporteurs proteiques du saccharose ou sa substitution par des composes non penetrants et de l'acide abscissique n'empeche pas les embryons de survivre. Suite a un pretraitement par le saccharose, il est possible que l'aba endogene et les proteines phosphatases, soient impliques dans la mise en place de la tolerance a la congelation. L'aba comme le saccharose est capable d'induire une accumulation de certaines proteines ayant des proprietes communes avec les proteines lea. Enfin, la fraction proteique hydrosoluble d'embryons somatiques pretraites par du saccharose est plus efficace que celle d'embryons non pretraites pour la protection in vitro de l'activite lactate dehydrogenase. La poursuite des etudes sur ces mecanismes d'acquisition de la tolerance a la cryoconservation des embryons somatiques contribuera a une meilleure connaissance non seulement de ce phenomene, mais egalement de phenomenes tels que la resistance aux stress abiotiques et d'embryogenese somatique. Enfin, elle conduira a une plus large exploitation de ces techniques pour la conservation du germplasm d'un nombre d'especes croissant