Interaction fonctionnelle entre l'hsp90 et les recepteurs des hormones steroides

Functional interaction between hsp90 and steroid receptors

• Auteur / Autrice : KWANG-IL KANG
• Direction : Étienne-Emile Baulieu
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Dans les extraits de tissus cibles, la proteine de choc thermique 90 kda (hsp90) a ete retrouvee en association avec les recepteurs steroidiens en absence de ligand. Pour demontrer l'interaction fonctionnelle in vivo entre le recepteur et l'hsp90, nous avons cible l'hsp90 de poulet, proteine essentiellement cytoplasmique, avec la sequence de localisation nucleaire de la nucleoplasmine (hsp90nls). Apres transfection dans les cellules cos7, l'hsp90nls est localisee dans le compartiment nucleaire. Le mutant du recepteur humain des glucocorticoides, delete du nls a ete egalement exprime dans ces cellules ; sa localisation est exclusivement cytoplasmique. La coexpression de l'hsp90nls et du mutant cytoplasmique du recepteur des glucocorticoides provoque la localisation de ce mutant dans le noyau, indiquant son transport piggyback par l'hsp90nls et l'interaction physique et fonctionnelle entre les deux proteines en absence d'hormone. De meme, la localisation nucleaire du mutant cytoplasmique du recepteur de la progesterone de lapin a ete obtenue apres cotransfection avec l'hsp90nls. Nous avons egalement montre que le recepteur sauvage nucleaire de la progesterone etait capable de provoquer la relocalisation nucleaire partielle de l'hsp90 sauvage. Pour etudier les fonctions modulatrices de l'hsp90nls sur l'activite transcriptionnelle induite par les hormones steroides, nous avons construit un plasmide contenant l'adn complementaire de la hsp90 de poulet (sauvage et nls) et le gene rapporteur. Apres transfection des plasmides dans les cellules murines 34i, possedant un recepteur fonctionnel des glucocorticoides, nous avons observe que la hsp90nls inhibait environ 50% de l'activite luciferase induite par un glucocorticoide synthetique. L'effet inhibiteur de l'hsp90nls parait specifique d'un promoteur hormono-module et proportionnel au taux d'hsp90nls exprimee dans les cellules 34i. L'effet inhibiteur medie par l'hsp90nls n'a pas ete observe dans d'autres lignees cellulaires, probablement a cause de la faible expression de l'hsp90nls transfectee