Les régions régulatrices du gène de la protéine de la soie P25 de Bombyx mori : protéines affines et étude chromatinienne in vivo
Auteur / Autrice : | Pascale Nony |
Direction : | Pierre Couble |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences. Biologie cellulaire et moléculaire |
Date : | Soutenance en 1995 |
Etablissement(s) : | Lyon 1 |
Jury : | Examinateurs / Examinatrices : Pierre Couble |
Résumé
Les genes codant les proteines de la soie chez bombyx mori sont l'objet d'une triple regulation transcriptionnelle: elle est tissulaire, territoriale et temporelle. Au laboratoire, nous etudions les bases de cette triple regulation en prenant comme modele le gene codant la proteine de la soie p25. Dans le cadre de ma these, j'ai identifie plusieurs facteurs proteiques capables de se fixer, in vitro, sur les sequences regulatrices de p25, et qui s'ajoutent aux deux deja decrits, bmfa et sgfb. J'ai ainsi identifie les complexes trio, ub2a, ub2b1 et ub2b2. J'ai etudie la distribution tissulaire de ces complexes, leur regulation en fonction de l'alternance mue/intermue, ainsi que leur site de fixation a l'adn. Bien que certains d'entre eux presentent des proprietes tres interessantes, aucun de ces complexes n'est specifique d'un seul territoire de la glande, et ne permet donc pas d'expliquer facilement la regulation territoriale du gene. Aussi, j'ai initie l'etude de l'occupation des sites de fixation des facteurs caracterises in vitro, in vivo, dans la chromatine native, en comparant la situation dans le territoire posterieur de la glande (ou p25 est transcrit en intermue) a celle du territoire median (ou p25 est en permanence reprime) et ce, en intermue larvaire. Les premiers resultats mettent en evidence un mecanisme de repression dans les cellules du reservoir mais egalement des interactions proteiques differentes dans les deux territoires de la glande, entre autre dans la zone de fixation du facteur sgfb. De facon interessante, ce facteur vient d'etre identifie comme etant indispensable a l'expression du gene dans les cellules du territoire posterieur de la glande. L'ensemble de ces resultats pourrait permettre d'expliquer la determination de la territorialite de l'expression de p25. Le role des facteurs trio, ub2a, ub2b1 et ub2b2 n'est pas encore etabli