L'époxyde hydrolase d'Aspergillus niger : purification, caractérisation et utilisation pour la préparation d'époxyde et de diols optiquement purs

An epoxide hydrolase from Aspergillus niger: purification, characterization and use to prepare optically pure epoxides and diols

• Auteur / Autrice : Christophe Morisseau
• Direction : Roland Furstoss
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie organique
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences (1969-2011)

Résumé

Nous avons etudie la mise au point d'un nouvel outil enzymatique: l'epoxyde hydrolase d'aspergillus niger, utilisable par le chimiste organicien pour realiser la preparation d'epoxydes et/ou de diols vicinaux optiquement purs. Une etude preliminaire sur la biohydrolyse d'esters de phenyl-glycidate par ce champignon, nous a montre que la preparation de la chaine laterale du taxotere n'etait pas realisable par cette voie de synthese. L'etude de la production et de la localisation de cette enzyme a montre qu'il s'agit d'une proteine soluble intracellulaire produite au cours de la croissance du champignon. L'epoxyde hydrolase d'a. Niger, impliquee dans la reaction de bioconversion, a ete purifiee et caracterisee. Cette enzyme differe des eh deja connues par ses caracteres moleculaires, mais montre des ressemblances par ses caracteres enzymatiques. Le mecanisme de cette enzyme est compatible avec un mecanisme basique generalise. Deux extraits enzymatiques bruts de cette enzyme ont ete mis au point, et nous avons defini les meilleures conditions operatoires pour utiliser ces preparations lors de l'hydrolyse enantioselective d'epoxydes racemiques. Ainsi a l'aide d'un processus chemio-enzymatique, nous avons prepare, en quatre etapes de synthese, l'antipode biologiquement actif du nifenalol