Comparaison des proprietes electrophysiologiques des canaux de la membrane externe de la mitochondrie. Individualisation et caracterisation du canal cationique sensible aux peptides

by MARC PELLESCHI

Doctoral thesis in Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Under the supervision of P. ASCHER.

defended on 1994

in Paris 6 .

  • Alternative Title

    Study of mitochondrial outer membrane ionic channels. Individualisation and caracterisation of a peptide sensitive cationic channel


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  • Abstract

    Cette these nous a permis de caracteriser et d'individualiser les deux types de canaux ioniques de grande conductance de la membrane externe de la mitochondrie et d'apporter des arguments a l'hypothese de l'implication de l'un d'eux dans l'importation de peptides par l'organite. Le canal le plus anciennement reconnu, le vdac (pour voltage dependent anionic channel), a ete exclusivement etudie par la technique de bicouche plane. Un autre canal, le psc (pour peptide sensitive channel), a ete recemment reconnu par la technique de tip-dip. Nous nous sommes attaches a demontrer la stabilite des caracteristiques du psc observe par differentes techniques de reincorporation (patch-clamp de liposomes geants, bicouche plane et tip-dip). Nous avons montre que le vdac peut etre observe, avec ses caracteristiques propres, sur les memes membranes et dans les memes conditions techniques que le psc. Nous avons ensuite exploite les possibilites offertes par l'utilisation de nouvelles techniques pour etudier une propriete nouvelle du psc de mitochondrie de levure: le phenomene d'inactivation du canal. Nous avons alors poursuivi la caracterisation du psc en mettant en evidence de nouvelles substances actives sur le canal. Parmis elles, se trouvent le premier bloquant impermeant du canal de levure, le mast cell degranulating peptide sous sa forme native, qui possede de plus la faculte unique d'agir specifiquement sur une seule des faces du canal, un modulateur des fermetures rapides, les cations mineraux multivalents, et un modulateur de l'inactivation le mcd sous sa forme reduite. Enfin, nous avons montre que le psc constitue la voie d'entree dans la mitochondrie d'un petit peptide basique (la dynorphine), en suivant la stricte correlation entre le blocage du canal par differentes substances et leur aptitude a bloquer l'importation de la dynorphine dans la mitochondrie. La sensibilite de l'importation de la dynorphine au mcd natif nous permet de determiner l'orientation du canal dans la membrane externe de la mitochondrie de levure

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Informations

  • Details : 213 P.
  • Annexes : 202 REF.

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