Etude cristallographique de la ferredoxine : nadp+ reductase d'anabaena pcc 7119 et de ses complexes avec le nadp+ et la feeredoxine

• Auteur / Autrice : LAURENCE SERRE
• Direction : Michel Frey
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

La ferredoxine:nadp+ reductase (fnr) issue de la cyanobacterie anabaena, est une flavoenzyme. Elle recoit deux electrons de deux ferredoxines ou deux flavodoxines qui lui permettront de reduire une molecule de nadp+. La fnr cristallise en presence d'une faible force ionique et de detergent. Sa structure tridimensionnelle a ete resolue par la methode de remplacement isomorphe multiple et est aujourd'hui affinee a 1. 8 a de resolution avec un facteur r de 19. 3%. Le complexe fnr:nadp+ a ete obtenu par diffusion du nadp+ dans les cristaux de fnr. Le modele final de ce complexe affine a 2. 1 a ne presente que la partie 2,5-adp du dinucleotide alors que l'ensemble de la region reactive du nadp+ semble desordonne dans le cristal. La structure de la fnr bacterienne est tres proche de celle de la fnr d'epinard. La topologie de la molecule est conservee et les sites de fixation du cofacteur et du nadp+ sont superposables. Dans les conditions de cristallisation de la fnr seule, il a ete possible d'obtenir des cristaux du complexe homologue fnr:ferredoxine. Bien que l'analyse du contenu des cristaux ait revele la presence des deux proteines dans les cristaux, seule la fnr a pu etre, a ce jour, localisee par remplacement moleculaire. Cependant, l'empilement cristallin des cristaux de complexe fnr:ferredoxine montre certaines differences avec celui des cristaux de fnr seule, susceptibles de preciser le site de fixation de la ferredoxine sur la fnr