Etude genetique de deux domaines conserves de c160, la plus grande sous-unite de l'arn polymerase iii de la levure saccharomyces cerevisiae

Genetic analysis of two conserved domains of c160, the largest subunit of the rna polymerase iii of the yeast saccharomyces cerevisiae

• Auteur / Autrice : Sylvie Hermann-Le Denmat
• Direction : Pierre Thuriaux
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Par analyse mutationnelle, nous avons montre que le domaine de liaison du zinc de type cx#2cx#6##1#2cxghxgx#2#4##3#7cx#2c et que le motif tres conserve nadfdgd(e/q)m(n/a), presents respectivement dans les domaines conserves a et d de la plus grande sous-unite de toutes les arn polymerases d'eucaryotes, sont essentiels a la fonction de l'arn polymerase iii de la levure saccharomyces cerevisiae. Les mutants thermosensibles obtenus dans chaque domaine ont ete analyses biochimiquement ou genetiquement. L'arn polymerase iii extraite d'un des mutants du domaine a, est sensible a la temperature et instable in vitro. Cette instabilite coincide avec la perte simultanee de trois sous-unites specifiques de l'enzyme: c82, c34 et c31. Deux nouveaux genes de levure (rpi1 et rpi2) ont ete identifies comme suppresseurs multicopies d'un mutant thermosensible affectant le domaine d. Le gene rpi1 code pour une proteine de 936 acides amines contenant le domaine fork head de liaison a l'adn initialement identifie dans des facteurs de transcription de mammiferes. La deletion du gene rpi1 entraine un defaut de maturation des arn ribosomaux. Le gene rpi2 code pour une proteine homologue a la proteine ribosomale s20 de rat. Dans les deux cas, la suppression pourrait agir en corrigeant le defaut de maturation des arn ribosomaux egalement observe dans les mutants thermosensibles de l'arn polymerase iii