Developpement et caracterisation de modeles de cultures de cellules tubulaires proximales renales : contribution a l'etude de la nephrotoxicite des complexes de platine

Development and characterization of culture models of renal proximal tubular cells: contribution for studying the nephrotoxicity of platinum complexes

• Auteur / Autrice : FRANCOISE COURJAULT-GAUTIER COURJAULT
• Direction : H. TOUTAIN
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

La recherche de modeles experimentaux in vitro pour etudier les tubulopathies proximales renales d'origine medicamenteuse nous a conduit a developper et a caracteriser des modeles de cultures de cellules tubulaires proximales. Les cellules de la lignee ok sont moins differenciees que les cellules tubulaires proximales en culture primaire. L'utilisation d'un milieu de culture sans insuline et sans glucose, condition qui ne modifie pas la differenciation des cellules tubulaires, reduit l'augmentation de la glycolyse mais ne module pas la decroissance de la neoglucogenese. L'utilisation consecutive de deux milieux de culture, l'un permettant de selectionner les cellules tubulaires proximales humaines sur la base de la neoglucogenese et l'autre assurant leur croissance, permet d'obtenir un modele de cellules tubulaires proximales tres differenciees tant d'un point de vue morphologique, biochimique que fonctionnel. Les cellules ok ne permettent pas de reproduire la toxicite des complexes de platine (cisplatine, transplatine et carboplatine) observee in vivo. Par contre, les cellules tubulaires proximales en culture primaire reproduisent leur toxicite aigue (cisplatine>transplatine ; cisplatine>>carboplatine) et l'alteration specifique de certaines fonctions cellulaires observees in vivo sous l'effet du cisplatine. Ces fonctions cellulaires ne sont pas alterees de facon specifique par le transplatine. L'etude de l'interaction precoce entre le cisplatine et la membrane de bordure en brosse a permis de mettre en evidence (i) une inhibition des transports de glucose et de phosphate couples au sodium et une stimulation du transport d'alanine dues a une alteration specifique de leur affinite (ii) une augmentation de la fluidite de la bordure en brosse associee a une diminution du contenu en cholesterol. Les effets du carboplatine sont similaires a ceux du cisplatine mais surviennent a des concentrations environ vingt fois superieures