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Thèse soutenue

Analyse structurale du site actif de trois métallopeptidases à zinc : endopeptidase neutre-24. II, aminopeptidase N et enzyme de conversion de l'angiotensine

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Auteur / Autrice : Armelle Hélène
Direction : B. Roques
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 1993
Etablissement(s) : Paris 6
Jury : Président / Présidente : Philippe Ascher
Rapporteurs / Rapporteuses : Jean-Pierre Gorvel

Résumé

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L'endopeptidase neutre, l'aminopeptidase n et l'enzyme de conversion de l'angiotensine sont trois metallopeptidases a zinc mammaliennes dont le séquençage a mis en évidence une homologie de séquence avec la thermolysine, endopeptidase à zinc bactérienne dont la structure tridimensionnelle et le mécanisme d'action sont connus grâce aux données de la cristallographie. Nous nous sommes intéressés à l'analogie d'organisation moléculaire du site actif de ces trois enzymes eucaryotes et de l'enzyme procaryote. Les modifications chimiques nous ont permis de montrer que le site actif de l'aminopeptidase n comporte des résidus fonctionnels caractéristiques des endopeptidases comme l'endopeptidase neutre et la thermolylysine mais également un carboxylate spécifique des aminopeptidases classiques. La mise en évidence d'une arginine analogue à celle de l'endopeptidase neutre dans le sous-site s'2 de l'enzyme de conversion de l'angiotensine permet d'expliquer la spécificité dipeptidylcarboxypeptidasique de ces deux enzymes, alors que la thermolysine qui ne possède pas un tel résidu est limitée à une action endopeptidasique sur ses substrats. Enfin, le marquage par photo affinité du site actif de l'endopeptidase neutre a permis de montrer que le sous-site s'1 responsable de sa spécificité pour les résidus hydrophobes est similaire à celui de la thermolysine et localise de façon analogue dans la séquence primaire des deux enzymes.