Proprietes et organisation des chromosomes naturels et artificiels de levure

Properties and organisation of natural and artificial yeast chromosomes

• Auteur / Autrice : Cécile Fairhead
• Direction : Bernard Dujon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1993
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La levure est un eucaryote unicellulaire dont le genome contient toute l'information necessaire a la vie d'une cellule. Ce genome de petite taille est actuellement en cours de sequencage par un ensemble d'equipes internationales. Nous avons participe au sequencage du chromosome iii. L'analyse de la sequence totale du iii confirme que la levure possede un genome compact, sans sequence repetee. Cent quatre-vingt-deux phases ouvertes de lecture de plus de cent codons ont ete revelees sur ce chromosome. La plupart d'entre elles correspondent a des fonctions inconnues jusqu'alors. La grande majorite des genes n'est pas essentielle a la vie de la cellule au laboratoire. La levure fournit des outils pour l'etude des genomes complexes. Nous avons participe a la mise au point de l'utilisation d'une endonuclease tres specifique, fournie par la mitochondrie de levure, utile en cartographie. Par ailleurs, nous avons experimente avec le systeme des chromosomes artificiels de levure, ce qui nous a permis de mettre en evidence un phenomene inattendu de fusion de fragments telomeriques. Enfin, nous avons etudie les mecanismes de reparation des cassures double brin de l'adn chromosomique de levure. Nous avons induit des cassures uniques in vivo, grace a un systeme d'expression nucleaire de l'endonuclease mitochondriale qui coupe des sites introduits artificiellement sur les chromosomes. Nous avons montre que la cassure est reparee en presence d'une copie intacte de la region coupee, par recombinaison homologue. La molecule coupee devient ainsi identique a la copie intacte. S'il n'existe pas de copie intacte de la region coupee, la grande majorite des cellules ne survit pas a l'induction de la cassure. Une faible proportion des cellules survit et repare la coupure par un mecanisme inconnu de religature imparfaite