La synthese du monoxyde d'azote par les macrophages actives par l'interferon gamma et ses implications biologiques

Macrophages activated by gamma interferon: synthesis of nitric oxide and biological consequences

• Auteur / Autrice : CATHERINE PELLAT-DECEUNYNCK
• Direction : Jean-Claude Drapier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

La synthese du monoxyde d'azote (no) a partir de l'arginine par les macrophages murins est sous le controle des cytokines et des derives bacteriens. L'activation des macrophages par l'interferon gamma et le lps induit rapidement la synthese de l'arn messager de 4,4 kb de la no synthetase dont l'activite enzymatique devient decelable dans les extraits cellulaires apres 3-4 heures, et qui persiste plusieurs jours. Nous avons montre qu'en presence de nicotinamide, le taux de l'arn messager et l'activite enzymatique de la no synthetase sont diminues; la nicotinamide semble s'opposer generalement a la reponse du macrophage a l'interferon gamma, dans la mesure ou nous avons mis en evidence que la nicotinamide previent l'expression des molecules de classe ii comme elle s'oppose a la regulation de l'arn messager du recepteur de l'interferon gamma induites par l'interferon gamma. L'activation des cellules raw 264. 7 par l'interferon gamma s'accompagne de l'inhibition de la proliferation cellulaire, de la synthese des proteines et de l'activite catalytique d'enzymes mitochondriales comme l'aconitase. Les cellules de cette lignee de macrophages, comme les macrophages, expriment les memes perturbations metaboliques que des cellules tumorales mises en contact de macrophages producteurs de no. A l'aide de la resonance paramagnetique electronique (rpe), nous avons etabli les conditions de detection d'un signal a g=2. 04 caracteristique de complexes entre le fer, no et le soufre. La mise en evidence de complexes de type (no)#2-fe(sh)#2 jusque dans les mitochondries des macrophages ou des cellules cibles permet de rendre compte de l'inhibition catalytique no-dependante des enzymes dont l'activite est gouvernee par des centres fe-s, aconitase, complexes i et ii de la respiration mitochondriale