Appareil traductionnel d'une bacterie gram#+. Clonage et caracterisation de l'operon contenant le gene infb codant pour le facteur de demarrage de la traduction if2 chez bacillus subtilis

Translation apparatus of a gram-positive bacteria. Cloning and characterisation of the operon containing the infb gene endoding the translational initiation factor if2 of bacillus subtilis

• Auteur / Autrice : KAMRAN SHAZAND
• Direction : Marianne Grunberg-Manago
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1992
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Le gene infb de bacillus subtilis codant pour le facteur de demarrage de la traduction if2 a ete clone chez e. Coli. L'alignement de sa sequence proteique avec celles d'autres bacteries montre une grande conservation au cours de l'evolution pour les deux tiers c-terminaux comprenant le domaine g. Le gene infb a ete localise a 145 sur le chromosome entre spcb et polc. Il code, tout comme chez e. Coli, pour deux proteines if2 alpha et if2 beta. Les deux formes d'if2 complementent in vivo un mutant d'e. Coli ou le gene infb a ete delete. Ce gene fait partie d'un operon d'environ 6kb qui contient egalement les equivalents des genes p15a, nusa, p15b, p35 et pnp. Ainsi la conservation entre b. Subtilis et e. Coli s'etend jusqu'a l'organisation genique concernant cette region du chromosome. L'interruption du gene infb ou de la region amont sont letales pour la bacterie. Un promoteur de type vegetatif, reconnu par le facteur sigma 43, a ete clone en amont de ces phases de lecture. L'extremite 5 correspondant a ce promoteur a ete identifiee par extension d'amorce, et un transcrit d'environ 5kb a ete mis en evidence par des hybridations de type northern. Ceci permet de presenter la structure palindromique en aval de p15b comme soit un terminateur transcriptionnel, soit un site de maturation post-transcriptionnelle