Un nouveau cytochrome polyhémique de haut poids moléculaire isolé de Desulfovibrio vulgaris Hildenborough : caractérisation et études structurales

Characterization of a high molecular weight polyhemic cytochrome c (mr 75 kda) isolated from d. Vulgaris hildenborough

• Auteur / Autrice : Mohammed Loutfi
• Direction : Mireille Bruschi
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie bactérienne
• Date : Soutenance en 1990
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Sulfobactéries

Résumé

Le cytochrome cc#3 de desulfovibrio vulgaris hildenborough a ete caracterise et ses proprietes physico-chimiques ont ete comparees avec celles des cytochromes multihemiques du meme organisme et de d. Desulfuricans norway. Le spectre d'absorption est similaire a celui des cytochromes c#3 (mr:13000) et le potentiel d'oxydo-reduction est de 180 mv/nhe. Les reactions phosphoroclastiques et reductions de sulfite et de thiosulfate ont ete testees. Le cytochrome cc#3 de d. Vulgaris hildenborough est plus actif dans la reaction de reduction de thiosulfate par comparaison avec les autres reactions. La sequence primaire en acides amines a ete etudiee par la methode recurrente d'edman; le chevauchement des peptides obtenus par clivage chimique (bromure de cyanogene) et hydrolyse enzymatique (endoproteinases: aspn; argc; gluc) evoque 87,54% de la sequence complete de la proteine avec 15 sites d'attachement d'hemes de type c. Une sonde nucleotidique localisee dans la partie c-terminale de la proteine a permis de localiser le gene et de le sequencer. La sequence nucleotidique indique la presence d'une sequence signal de 22 acides amines du cote n-terminal du precurseur en accord avec la localisation periplasmique du cytochrome cc#3 mise en evidence lors de l'extraction des proteines periplasmiques. La molecule contient 514 residus et est caracterisee par la presence de 16 motifs cys-aa-aa-cys-his qui seraient impliques dans la fixation de 16 hemes de type c. 15 de ces hemes pourraient avoir comme une histidine 6eme ligand axial. Des formes cristallines ont ete obtenues; une etude en cours par rayon x permettra de preciser les relations structure-fonction de ce type de cytochrome multihemique