Recherche Avancée

Thèse soutenue

Isolement, caractérisation des sous-unités du complexe F1-ATPase mitochondriale de la betterave (Beta vulgaris L. ) : activité, structure, variation dans le genre Beta

FR  |  
EN
Auteur / Autrice : Chadia Chahed El Ouazzani
Direction : Jean-Claude Mounolou
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques
Date : Soutenance en 1989
Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

FR

Nous avons purifié le complexe F1-ATPase à partir de SMP de racines de betterave cultivée, caractérisé son activité et sa structure à l'état associé aux SMP et à l'état soluble. L'activité F1-ATPasique a été caractérisée selon les conditions optimales de pH, MgCl2 et en présence d'inhibiteurs spécifiques du complexe F1-ATPase. Le complexe F1-ATPase dans la fraction purifiée par fractionnement au sulfate d'ammonium a une activité spécifique de 15 µMoles d'ADP/min/mg de protéines. Il est constitué de cinq sous-unités α, ß, γ et δ et de PM respectifs 56,3 kDa, 54 kDa, 35 kDa, 25,5 kDa et 15 kDa. Nous avons analysé le complexe F1-ATPase de trois variétés de betterave cultivée, hybride mâle stérile, stérile et mainteneur de stérilité. Les poids moléculaires de l'ensemble des sous-unités α, ß, γ et δ et l'activité du complexe F1-ATPase isolé chez ces trois variétés de betterave sont identiques. Nous avons produit un sérum anti-sous-unité ß. A l'aide de ce sérum anti-sous-unité,nous avons étudié la variabilité de la sous-unité des protéines mitochondriales et chloroplastiques de betteraves sauvages et cultivées en immunoblotting. La sous-unité ß mitochondriale a une position équivalente chez les espèces étudiées de betteraves sauvages et cultivées. De même la sous-unité chloroplastique de PM 52 kDa ne varie pas chez les espèces étudiées de betteraves sauvages et cultivées. Nous avons produit un sérum anti-F1-ATPase de betterave hétérogène de mélange de trois populations tétraploides. Ce sérum immuno révèle les sous-unités α, ß, γ et δ du complexe F1­ ATPase des protéines mitochondriales et du complexe F1-ATPase soluble. Chez les espèces étudiées de betteraves sauvages et cultivées, les sous-unités α, ß, γ et δ ont des positions équivalentes analysées en immunoblotting à l'aide de ce sérum anti-F1-ATPase. Chez le cytoplasme mâle stérile et mainteneur, les sous-unités α, ß, γ et ne présentent pas de variabilité. Nous avons analysé le profil électrophorètique des protéines mitochondriales et chloroplastiques chez les espèces de betteraves sauvages et cultivées. L'analyse électrophorètique des protéines mitochondriales et chloroplastiques permet de distinguer des protéines spécifiques aux trois sections Vulgares, Corollinae et Patellares.