Rôle de la glycosylation dans l'immunoréactvité de la thyrotropine humaine

Importance of the glycosylation for the immunoreactivity of human thyrotropin

• Auteur / Autrice : Marie-Jeanne Papandréou
• Direction : Catherine Ronin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Neurosciences
• Date : Soutenance en 1989
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 2
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université d'Aix-Marseille II. Faculté des sciences

Résumé

La thyrotropine possede deux sous-unites alpha et beta et trois chaines glycanniques n-liees. Le clivage chimique de ces glycannes conduit a une perte d'activite biologique de l'hormone animale. L'hypothese sur laquelle nous avons travaille est qwue l'enlevement des glycannes induit des modifications de la conformation de la thyrotropine humaine (htsh). Dans un premier temps, nous avons choisi de deglycosyler enzymatiquement cette glycoproteine radioiodee. Une preparation d'endoglycosidase f ne parvient a deglycosyler totalement l'hormone qu'en dissociant les deux sous-unites. La deglycosylation du dimere est en revanche plus selective et n'affecte principalement que la sous-unite beta. Sur l'hormone native, la deglycosylation est due a une activite n-glycannase et conduit a un melange de formes partiellement ou totalement deglycosylees que nous avons purifiees. Par la suite, a l'aide d'anticorps monoclonaux, diriges contre douze epitopes distincts sur l'hormone, nous avons apprehende les modifications de conformation des sites antigeniques apportees a la htsh par la deglycosylation. Tous les anticorps monoclonaux que nous avons utilises reconnaissent la forme deglycosylee sur la sous-unite beta de la meme maniere que la htsh native. Par contre, ceux diriges contre la sous-unite beta et ceux diriges contre le dimere specifiquement voient leur reconnaissance diminuee vis-a-vis de la forme totalement deglycosylee. Des anticorps polyclonaux reagissent de facon similaire aux anticorps monoclonaux. En conclusion, notre etude montre que la glycosylation de la htsh conduit a des modulations de la conformation a la surface de l'hormone, interessant plus precisement les domaines antigeniques de la sous-unite beta et moins ceux de la sous-unite alpha