Amplification ex vivo et greffe des cellules souches hématopoïétiques du sang de cordon ombilical : Rôle des glycosaminoglycannes

• Auteur / Autrice : Lionel Faivre
• Direction : Jérôme Larghero
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biothérapies et biotechnologies
• Date : Soutenance en 2015
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Glycosaminoglycanes

Amplification génique

Cellules souches hématopoïétiques

Sang de cordon ombilical

Transplantation de cellules souches hématopoïétiques

Cellules sanguines -- Radiomarquage

Radiotoxicité

Résumé

Le microenvironnement a une place centrale dans le bon déroulement de l'hématopoïèse. Les glycosaminoglycannes (GAG) sont nécessaires au bon fonctionnement de ce tissu en raison de leurs interactions avec les cytokines hématopoïétiques. En parallèle, lors de greffe de cellules souches et progénitrices hématopoïétiques (CSPH) du sang de cordon ombilical, il apparait clairement que des améliorations sont nécessaires. De nombreuses solutions ont été proposées, certaines semblent prometteuses mais nécessitent des progrès. Objectifs : Améliorer les protocoles d'amplification en utilisant des GAG mimétiques. Développer une thérapie matricielle de la moelle osseuse lors de la greffe de CSPH. Les résultats d'amplification avec les GAG mimétiques ont pu mettre en évidence une diminution de la migration des CSPH à de fortes concentrations associée à une meilleure viabilité des CSPH. Après greffe dans des souris NOD-SCID/yc-/-, aucune différence n'a été observée. L'irradiation induirait une diminution de la quantité de GAG présent dans les moelles osseuses mais nos tentatives de thérapie matricielles lors de greffe de CSPH n'ont pas montré de résultats probants. En parallèle, une technique de radiomarquage des CSPH au '8F-FDG, a permis de visualiser et de quantifier leur homing en imagerie TEP/CT durant 2,5h après l'injection malgré une forte toxicité cellulaire du radiomarquage. Dans nos conditions, les GAG mimétiques ne présentent pas d'intérêts majeurs dans les protocoles d'amplification ou de greffe des CSPH en remplacement de la matrice dégradée. La biodistribution précoce des CSPH en imagerie TEP/CT z été possible mais nécessite des ajustements techniques.

The microenvironment has a central place in the smooth running of hematopoiesis. Glycosaminoglycans (GAG) are necessary for the proper functioning of this tissue due to their interactions with hematopoietic cytokines. In parallel, in hematopoietic stem and progenitor cells (HSPC) from umbilical cord blood graft, it is clear that improvements are needed. Many solutions have been proposed, some show promise but require progress. Objective: Improve amplification protocols using GAG mimetics. Developing a matrix therapy of bone marrow during transplantation HSPC. The amplification results with GAG mimetics have been able to demonstrate a reduction in the migration of HSPC with high concentrations associated with better viability of HSPC. After transplantation into SCID-NOD yc , no difference was observed. Irradiation would lead to a decrease of GAG present in bone marrow but the matrix therapy attempts for transplant HSPC showed no conclusive results. In parallel, an 18F-FDG radiolabeling technique of HSPC, helped to visualize and quantify their imaging homing with PET/CT for 2. 5 h after injection despite strong cell toxicity of radiolabeling. In our conditions, the GAG mimetics show no major interests in the amplification protocols or HSPC transplantation. Early biodistribution with HSPC PET/CT imaging was possible but requires technical adjustments.