Caractérisation du rôle de la Phospholipide Scramblase 1 (PLSCR1) dans l'activation mastocytaire et les réactions allergiques IgE-dépendantes

Characterization of PLSCR1 role in IgE-mediated mast cell activation and allergic reactions

• Auteur / Autrice : Asma Kassas-Guediri
• Direction : Marc Benhamou
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : [Physiologie et physiopathologie]
• Date : Soutenance en 2015
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Bio Sorbonne Paris Cité (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Anaphylaxie

Allergie

Phospholipides

immunologie

Mastocytes

Résumé

Les mastocytes (MC) sont les acteurs principaux des réactions allergiques d'hypersensibilité de type I par la libération de médiateurs pro-inflammatoires suite à leur activation via le récepteur de haute affinité pour les immunoglobulines de classe E (RFcc1). Le laboratoire a identifié la Phospholipide Scramblase 1 (PLSCRI) comme un nouvel effecteur moléculaire de la signalisation du RFcsI. La PLSCR1 amplifie la dégranulation et la production de VEGF du MC par son implication dans la voie initiée par la tyrosine kinase Lyn. De plus, la PLSCR1 est associée à Lyn et Syk et est fortement phosphorylée sur résidus de tyrosine suite à l'agrégation du RFccI. Nous avons maintenant caractérisé le mécanisme conduisant à la phosphorylation de la PLSCRI. Nous montrons que la draine FcRy et l'axe Lyn/Syk/Mobilisation du calcium favorise la phosphorylation de la PLSCR1. A l'inverse la voie initiée par Fyn semble inhiber cette phosphorylation. A l'aide de souris plscrl-/-, nous confirmons le rôle amplificateur de la dégranulation mastocytaire de la PLSCR1 in vitro dans des cultures primaires d MC comme précédemment démontré dans une lignée de rat RBL-2H3. De plus, in vivo, dans un modèle d'anaphylaxie systémique passive les souris plscrl-/- sont protégées de la réaction par rapport aux souris WT à une dose d'antigène optimale. Le lien entre cette phosphorylation de la PLSCRI soumise à un mécanisme complexe de régulation et sa fonction amplificatrice de la dégranulation reste à établir. Néanmoins, dès à présent cette étude aura permis de mieux comprendre le rôle de la PLSCR1 dans l'activation du mastocyte via le récepteur RFceI au cours des réactions allergiques IgE-dépendantes.

Mast cells are the main actors of hypersensitivity type I (allergie) reactions by the release of proinflammatory mediators following their activation by the high-affinity receptor for immunoglobulin E (FccRI). The laboratory lias identified the Phospholipid Scramblase 1 (PLSCRI) as a new molecular intermediate of FccRI signaling. PLSCR1 amplifies mast tell degranulation and VEGF production by its modulation of the pathway initiated by the tyrosine kinase Lyn. Furthermore, PLSCRI is associated wit Lyn and Syk and it is strongly phosphorylated on tyrosine residue alter aggregation of Feel. We have now characterized the mechanism leading to PLSCRI phosphorylation. We show that the FcRy chain and the Lyn/Syk/Calcium mobilization axis promote PLSCRI phosphorylation. Conversely, the Fyn pathway seems to inhibit this phosphorylation independently of an alteration of Lyn/PLSCRI association. Using plscrl-/- mice, we also confirm the PLSCR1 degranulation amplifier function in vitro in primary culture of bone marrow derived mast cells (BMMCs) previously demonstrated in the rat mast tell line RBL-2H3. Furthermore, in vivo, in a model of passive systemic anaphylaxis (PSA), plscrl-, mice appear to be protected from the reaction when compared to WT mice at an optimal dose of antigen. The link between this FccRI-dependent PLSCRI phosphorylation resulting from a complex regulatory mechanism and its signal amplification function remains to be established. However, this study has already allowed a better understanding of the PLSCRI role in FcaRI-dependent mast cell activation in IgE-mediated allergic reactions.