Les protéines 14-3-3 et leurs cibles dans la voie de signalisation conduisant à la mort cellulaire programmée en réponses aux sphingolipides : régulation par le calcium

par Elsa Prigent

Thèse de doctorat en Développement des plantes

Sous la direction de Valérie Cotelle et de Christian Mazars.

Soutenue en 2013

à Toulouse 3 .


  • Résumé

    En réponse aux attaques des plantes par des pathogènes, les bases à longues chaînes (LCBs) précurseurs des sphingolipides, participent à la mise en place d'une mort cellulaire programmée (PCD) chez les végétaux. Dans ce cadre, l'objectif du travail de thèse a été de caractériser cette voie de signalisation peu connue à ce jour. Ainsi, chez Arabidopsis thaliana, la régulation par les LCBs et le calcium d'une protéine kinase calcium-dépendante (CPK3) et des protéines 14-3-3s a été caractérisée. En réponse aux LCBs, CPK3 phosphoryle ses partenaires les 14-3-3s, conduisant à la dissociation du complexe et à la dégradation de CPK3. De plus, CPK3 a été identifiée comme un régulateur positif de la PCD médiée par les LCBs. En parallèle, de nouvelles cibles de 14-3-3s potentiellement impliquées dans cette PCD ont été identifiées par une approche de chromatographie d'affinité aux 14-3-3s associée à une analyse de protéomique quantitative avec marquage cellulaire isotopique 14N/15N.

  • Titre traduit

    14-3-3 proteins and their targets in the signalling pathoury leading to programmed cell death (PCD) induced by sphingolipids : regulation by calcium


  • Résumé

    LCBs (Long Chain Bases) are involved in programmed cell death (PCD) in plants occurring during plant-pathogen interactions. The aims of this PhD project were to characterize this still unknown signalling pathway. In Arabidopsis thaliana, we characterized the calcium and LCB regulation of a calcium-dependent protein kinase (CPK3) and 14-3-3 proteins. We demonstrated that PHS induces calcium-dependent activation of CPK3, that phosphorylates its binding partners, the 14-3-3 proteins. This phosphorylation leads to the disruption of the complex and to CPK3 degradation. Using cpk3 knockout mutant lines, we demonstrated that CPK3 is a positive regulator of LCB-mediated PCD. In addition, new putative 14-3-3 targets involved in sphingolipid-induced PCD were identified by quantitative proteomics using 15N-based metabolic labeling combined with selective enrichment of 14-3-3 partners by affinity chromatography.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (160 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 115-160. Annexes

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 2013 TOU3 0222
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