Etudes de la monocytopoïèse issue de cellules hESC ou iPSC

par Sofiane Hamidi

Thèse de doctorat en Biologie, Hématologie

Sous la direction de William Vainchenker et de Françoise Norol.

Soutenue en 2013

à Paris 7 .


  • Résumé

    My work was focused on the monocyte and macrophage lineages. We have shown that Monocyte/macrophage derived from ES cells are cells extremely specialized in tissue remodeling, pro-angiogenesis and immune suppression but with low inflammatory potential. I have investigated the characteristics of monocytes/macrophages from iPS. Those monocyte/macrophage were quite similar to hESC derived, but exhibited more inflammatory potential suggesting some incomplete reprogrammation during derivation of IPS. We hypothesize that the decrease or absence of inflammatory potential of the monocyte/macrophages could be related to a decrease activation of the JAK2/STAT pathway induced by IFN-y and GM-CSF, two cytokines implicated in MI polarization. In this purpose we derive iPS from patient harboring the JAK2V617F mutation, a gain of fonction mutation associated with myéloproliférative neoplasm. In preliminary results, no significant differences were observed in the polarization of JAK2V617F or JAK2WT monocyte/Macrophages derived from IPS. Furthermore we found that IFN-y was capable to normally induce STAT1 activation in these cells suggesting that the blockage in inflammatory response is downstream STAT1 and may be related to epigenetic regulation of inflammatory gens. Finally I have obtained preliminary results showing that JAK2V617F may induce independence to bFGF of the pluripotent iPSC, a result very similar to those reported by Griffiths and al on JAK2V617F mESC who could maintain their pluripotent phenotype without addition of LIF. This was not related to the induction of the canonical STAT pathway but to an effect of nuclear JAK2 on the epigenetic regulation of Nanog.

  • Titre traduit

    Studies of the hESC or iPSC derived monocytopoïesis


  • Résumé

    Mon travail a consisté à caractériser la monocytopoïèse dérivée d'hESC et à confirmer in-vitro que les macrophages obtenus partageaient les mêmes fonctions homéostatiques que ceux dérivés de foetus. J'ai ensuite dérivé des lignées d'iPSC à partir de cellules CD34+ d'un sujet sain et muté JAK2V617F. Ma première étude a consisté à comparer les macrophages issus de la différenciation d'hESC à ceux issus d'iPSC contrôle. Cette partie de mon travail a permis de montrer que les macrophages issues d'IPSC sont très proches de ceux dérivées de hESC mais présentent des différences significatives dans la sécrétion de certaines molécules de la réponse inflammatoire à l'IFN-y et au LPS. Enfm nous avons souhaité étudier grâce à la technologie des iPSC l'implication de la voie JAK/STAT dans le phénotype fonctionnel des macrophages embryonnaires et dans leur défaut de réponse à l'IFN-7 et au LPS. Les résultats préliminaires ne montrent ni de différences dans la polarisation des monocytes/ macrophages JAK2V617F, ni d'altération dans l'activation de STAT1 via l'IFN-7. Les différences ontogéniques sont donc liées soit à des modifications épigénétiques dans les gènes impliqués dans l'inflammation ou dans les partenaires de STAT1. Un travail encore plus préliminaire a été d'explorer les éventuelles indépendances au bFGF des iPS( pluripotentes. En effet un travail de Griffiths et al a montré que les mESC JAK2V617F pouvaient mainteni leur phénotype pluripotent en l'absence de LIF via son action nucléaire indirecte sur le promoteur de Nanog Les résultats préliminaires montrent que les lignées d'IPSC JAK2V617F humaines pouvaient maintenir li phénotype pluripotent et cela en l'absence de bFGF.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (282 p.)
  • Annexes : 315 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2013) 266
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