Rôle de lutheran/ Basal Cell Adhesion Molecule (Lu/BCAM) dans la permsélectivité glomérulaire et l'adhérence leucocytaire au cours des néphropaties murines

par Jin Huang

Thèse de doctorat en Biologie et pharmacologie de l'hémostase et des vaisseaux

Sous la direction de Pierre-Louis Tharaux.

Soutenue en 2013

à Paris 7 .


  • Résumé

    La glycoprotéine Lu/BCAM, a initialement été découverte comme un antigène de groupe sanguin. Etant fortement exprimée dans l’endothélium rénal, on suggère qu'elle a un rôle majeur dans l'adhérence leucocytaire ainsi que dans le contrôle de permsélectivité glomérulaire. C'est un récepteur avec deux types moléculaire. D'une part la laminine α5 qui compose en particulier les laminines 10 et 11 de la matrice sous-endothéliale, d'autre part l'intégrine α4ß1 (VLA-4) présente à la surface leucocytaire. Les souris Lu/BCAM1' présentent de légères anomalies au niveau de la morphologie glomérulaire, telles qu'un épaississement local de la membrane basale glomérulaire (MBG) et parfois un élargissement des pieds des podocytes. Nous avons donc émis deux hypothèses : Premièrement, l'expression endothéliale de Lu/BCAM pourrait favoriser l'adhérence leucocytaire à l’endothélium via l'intégrine α4ß1 (VLA-4) ; deuxièmement, Lu/BCAM pourrait limiter la permsélectivité glomérulaire en favorisant l'ancrage des cellules endothéliales à la MBG contenant la laminine. Afin de tester notre première hypothèse, un modèle de glomérulonéphrite rapidement progressive (GNRP) a été induit par injection de sérum néphrotoxique (NTS) contenant un anticorps anti-MBG. Les souris Lu/BCAM~ NTS-traitées montrent une protection dans le contexte de protéinurfe, de la fonction rénale, de l'histologie rénale, de la formation des glomérulaires à croissant, du dépôt de fibrine, du nombre de podocyte et de l'infiltration leucocytaires (CD3, F4/80, MAC-1, MAC-3, CD68). Le test d'adhérence leucocytaire humain a confirmé que les leucocytes adhèrent sur Lu-Fc via α4ß1. Pour répondre à notre deuxième hypothèse, les souris ont été soumises au modèle d'HTA par perfusion d'angiotensine II pendant 28 jours ou par administration d'un inhibiteur de NO synthase (L-NAME) pendant 90 jours. Les deux traitements induisent une augmentation similaire de la pression artérielle chez les deux groupes de souris. Pourtant, les souris Lu/BCAM ~ présentent une augmentation plus importante de l'albuminurie avec un traitement à l'AngII et au L-NAME comparées aux souris contrôles. Une précipitation massive de l'albumine a été fréquemment observée dans la chambre urinaire chez les souris Lu/BCAM1' traitées à l'AngII. De plus, nous avons testé la permsélectivité vasculaire au niveau des carotides. La diffusion sous endothéliale de dextran (70KDa) couplé au FITC était augmentée en absence de Lu/BCAM. Enfin, les souris Lu/BCAM ~ présentent une augmentation de perméabilité au BE au niveau des reins. Cette hyperperméabilité n'est pas différente dans le cerveau, la rate ou le foie. En conclusion, nos résultats suggèrent que : 1, Lu/BCAM entraine une accumulation des leucocytes (notamment monocytes et polynucléaires neutrophiles) dans le glomérule inflammatoire. Les effets de cette Glycoprotéine sur le recrutement leucocytaire sont possibles via la liaison Lu/BCAM/VLA-4. 2, Lu/BCAM n'a pas d'effet sur la pression artérielle systolique induite par l'AnglI mais elle joue un rôle essentiel dans la perméabilité glomérulaire au cours de l'HTA et dans la perméabilité endothéliale extra-rénale.

  • Titre traduit

    Role of Lutheran/ Basal Cell Adhesion Molecule (Lu/BCAM) in leukocyte recruitment and in glomerular permselectivity during nephropathy model in mice


  • Résumé

    Lu/BCAM blood group glycoprotein, due to its important expression in renal endothelium, is suggested involved in facilitating accumulation of leukocyte and maintained the glomerular permselectivity. Lu/BCAM has been recognized as a receptor for two types of molecules. On one hand, it is a receptor for laminin α5 chain which constitute in particular lamininlO and 11 in the sub-endothelial matrix; on the other hand, it is a receptor for integrin α4ß1 (VLA-4) which present on the surface of leukocyte. Lu/BCAM-/-mice exposes abnormalities characterized by an irregular thickening of the glomerular basement membrane and sometimes an abnormal enlargement of foot process of podocyte. We have made two hypotheses: firstly, Lu/BCAM could promote leukocyte adhesion on endothelium via integrin α4ß1; secondly, Lu/BCAM could limit glomerular permselectivity by maintaining EC to GBM containing laminin α5 chain. To respond our first hypothesis, a passive RPGN model has been used. In this model, Lu/BCAM-/-mice attenuated glomerular accumulation of T cells and macrophages, crescent formation, and proteinuria, correlating with reduced fibrin and platelet déposition in glomeruli. Furthermore, we found pro-adhesive interaction between human monocyte α4ß1 integrin and Lu/BCAM proteins. For proving our second hypothesis, hypertension and glomerulosclerosis were induced by high salt diet (5% NaCl) and chronic infusion of Angiotensin II (l μ g/kg/min) or PBS in an osmotic mini-pump for 28 days or by administration of a NO syntheses inhibitor L-NAME in Lu-/-mice for 90 day in Lu/BCAM-/- mice and their wild-type littermates. Despite of a similar arterial tension, Lu/BCAM-/- hypertensive mice exhibited higher albuminuria. During Dextran-FITC (70K Da) diffusion test, a vascular hyper-permeability was observed in Lu/BCAM-/- carotid compared with their WT group. Furthermore, Lu/BCAM-/- mice displayed also a renal hyper-permeability during evans bleu permeability test, but this hyperpermeability was not found in the other organs such as brain, spleen and liver. In conclusion, the results indicated that: 1, Lu/BCAM-/- mice could possess a nephroprotective function in the early stage of GNRP when the leukocyte (monocyte and macrophage in particular) attached to into inflammatory glomerulus. It's function of leukocyte recruitment was possibly accomplished via VLA-4 ; 2,Lu/BCAM has no effect on systolic blood pressure but it plays a major role in glomerular permselectivity during hypertension and it has a extra reral endotherial permeability.

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  • Détails : 1 vol. ([152] p.)
  • Annexes : 323 Réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2013) 113
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