Notch pathway in liver progenitors

par Sara Ortica

Thèse de doctorat en Bases fondamentales de l'oncogénèse

Sous la direction de Alain Israël.

Soutenue en 2012

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Signalisation notch et progéniteurs hépatiques


  • Résumé

    La voie de signalisation Notch intervient dans la communication intercellulaire. Chez les mammifères, quatre récepteurs Notch (Notch 1-4) sont exprimés. Ils sont présents sous forme hétérodimérique à la surface cellulaire. Après l'interaction avec un ligand, Notch est activé par une cascade de clivages. La forme activée du récepteur (Nie, pour "Notch intracellulaire") est alors transportée dans le noyau, où elle active la transcription des gènes cibles. Pour mieux comprendre l'influence de Notch sur les progéniteurs hépatiques nous avons utilisé un système in vitro basé sur des cellules bipotentielles issues d'un foie murin embryonnaire (BMEL : Bipotential Mouse Embryonic Liver cells). Ces cellules peuvent être cultivées à l'état indifférencié, ou orientées vers un lignage hépatocytaire ou cholangiocytaire. Notch est actif à l'état indifférencié, et nous avons démontré que son inhibition induit une diminution dose-dépendante de la prolifération des BMEL, en réduisant l'entrée dans la phase S du cycle. Nic2 et Nic4 peuvent complémenter cet effet sur la prolifération, alors que Nic3 réduit la prolifération et augmente la polyploïdie. En outre, Nic3 permet la différenciation hépatocytaire, alors que les autres récepteurs doivent être inhibés pour permettre ce processus. En conclusion, nous avons montré que les quatre récepteurs Notch ont des rôles non redondants au cours du développement hépatique. Nous avons également testé les effets de Num. B, un inhibiteur de Notch, exprimé dans les hépatocytes. L'expression de Numb réduit la prolifération des BMEL, augmente leur volume et leur polyploïdie, avec une expression de marqueurs hépatocytaire.


  • Résumé

    Notch signalling is a highly conserved pathway that mediates short-range communications inter-cells. In mammals, four Notch receptors (Notch 1-4) are present. The receptor stands as a transmembrane heterodimer at the cell surface and it is activated after the interaction with a ligand. After a series of cleavages the activated form of the receptor (Nie) is translocated into the nucleus, where it activates target gene transcription. To get a better insight into the mechanisms of Notch function in liver progenitors we chose to use an in vitro System based on Bipotential Mouse Embryonic Liver (BMEL) cells. These progenitors can be maintained in the undifferentiated state or differentiated into hepatocytes or cholangiocytes. Our results show that Notch is active in undifferentiated BMEL cells, and that its inhibition decreases BMEL cell proliferation in a dose-dependent manner, through inhibition of S phase entry. Nic2 and Nic4 can complement the inhibition on proliferation, while Nic3 impairs proliferation and increases multinucleation. Moreover, we find that Nic3 is conducive of hepatocytic specification, while the other Notch receptors inhibit this fate. In conclusion, we show that the four Notch receptors have non-redundant roles during liver development, and that the type of the receptor involved can be more important than the overall pathway activation. Finally, we tested the effects of Numb, a Notch inhibitor upregulated upon hepatocytic commitment. Expression of Numb in undifferentiated progenitors reduces their proliferation rate, and induces a hepatocyte-like phenotype with large and multinucleated cells expressing hepatocytic markers.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (207 p.)
  • Notes : Thèse confidentielle jusqu'au 19/12/2014
  • Annexes : 343 Réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2012) 175
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.