Etude des voies moléculaires modulées par le niveau d'expression du facteur de transcription SCL/TAL1 dans les cellules souches hémotopoïétiques humaines

par Aissa Benyoucef

Thèse de doctorat en Biologie des cellules sanguines

Sous la direction de Françoise Pflumio.

Soutenue en 2012

à Paris 7 .


  • Résumé

    Le Facteur de transcription (FT) TAL1 est un régulateur clé de l’hématopoïèse. Les études menées chez la souris ont montré que ce facteur possède des fonctions (1) dans la spécification du tissu hématopoïétique à partir des cellules endothéliales du feuillet mésodermique ou des cellules ES et (2) dans le processus de différenciation des progéniteurs immatures myéloïdes (CMP) et érythro-mégacaryocytaires (MEP). Concernant son rôle dans le compartiment des CSH adultes, chez la souris plusieurs études ont montré l'implication de TAL1 dans le maintien et la survie des CSH. Afin de cibler l'effet de la surexpression de TAL1 dans une population enrichie des CSH (eCSH), nous avons développé un système de surexpression inductible de TAL1. Les résultats obtenus in vitro montrent que la surexpression transitoire de TAL1 pour 1 semaine n'altère pas la fréquence des progéniteurs LTC-IC issues des eCSH. En revanche la transplantation dans les souris NSG montre que cette surexpression transitoire de TAL1 permet le maintien de la population CSH capable de générer l’hématopoïese après 8 à 10 semaines de transplantation, sans altérer leur potentiel de différenciation myélo- lymphoïde. Afin d'étudier le rôle joué par TAL1 dans la régulation des voies de signalisation modulant l'activité des CSH. Après une étude de profil transcriptomiques des eCSH+/-TALl nous nous sommes intéressés au rôle de la protéine DDIT4 dans les CSH. Cette protéine dans l'expression est régulée par TAL1, joue un rôle dans la régulation négative de l'activation de la voir mTOR. Des expériences de diminution d'expression montrent la nécessité de son expression pour le maintien et la survie des CSH.

  • Titre traduit

    Study of the molecular pathways modulated by the level of expression of the transcription factor scl/tall in human hematopoietic stem cells


  • Résumé

    The SCL/TAL1 transcription factor is widely expressed during hematopoiesis, from hematopoietic stem cell (HSC) stage to erythro-megakaryocytic cells. Its expression levels tightly regulate the molecular programs implicated in the balance between quiescence/self-renewal and differentiation of HSC. We have previously shown that ectopic SCL expression allowed human HSC maintenance or expansion, as revealed by SRC (SCID-repopulating cell) activity in NOD-SCID mice, as well as imbalanced differentiation and generation of lymphoid and myeloid progenitors (Reynaud, 2005). On the contrary, interfering with SCL fonction either by delivery of a dominant negative form of SCL or by knocking down SCL expression impaired HSC SCID-repopulating ability while reducing their ability to differentiate Ectopic expression of SCL using a conditional expression System based on lentiviral TET/ON vectors showed that transient ectopic SCL expression on CD34⁺CD38⁻/lowCD45RA~CD90+ (eHSC) for 7 days maintains LTC-IC frequency and SCID-repopulating ability without affecting differentiation capacities, whereas non-expressing SCL cells lost their immature progenitor abilities, thus suggesting that transiently increased SCL levels help maintaining human HSC in vitro and in vivo. In order to decipher the mechanisms by which SCL regulates human HSC, we performed transcriptome analysis on eHSC, after either gain or loss of function of SCL. Statistical analysis identified the mTOR pathway as an activation target of SCL in human eHSC by down-regulate expression of DDIT4 gene.

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  • Détails : 1 vol. (180 f.)
  • Annexes : 483 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2012) 126
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 9841
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