Implication de la proline racemase dans la biologie de Trypanosoma vivax

par Simon d' Archivio

Thèse de doctorat en Parasitologie

Sous la direction de Paola Minoprio.

Soutenue en 2012

à Paris 6 .


  • Résumé

    Trypanosoma vivax est l’un des principaux parasites responsables de la Trypanosomose Animale Africaine. Malgré son impact considérable, il est très peu étudié et on déplore l’absence d’outil permettant la recherche sur ce parasite, comme un modèle murin robuste ou des conditions permettant sa culture in vitro et sa transgénèse. Nous avons identifié chez T. Vivax, la présence d’une proline racémase (PRAC), homologue de la TcPRAC, un mitogène et un facteur de virulence de T. Cruzi découvert et caractérisé au laboratoire. Nous avons donc développé tous les outils pour déterminer le rôle de cette protéine chez T. Vivax. Nous avons établit un modèle murin d’infection à T. Vivax présentant les caractéristiques majeures des bovins affectés: une anémie sévère, des lésions macroscopiques au niveau du foie et de la rate ainsi que des œdèmes au cerveau, le tout aboutissant à la mort de l’animal. Nous avons mis au point la culture axénique de ce parasite sous sa forme épimastigote, construits des vecteurs spécifiques de T. Vivax et définis des conditions de transfection permettant l’obtention des premiers transfectants de T. Vivax génétiquement modifiés de façon stable. La création d’une souche exprimant la luciférase nous a permis de consolider le fait que T. Vivax est capable de franchir la barrière hémato-encéphalique durant la phase tardive de l’infection. Enfin, nous avons inactivé les gènes TvPRAC par recombinaison homologue (∆TvPRAC) et avons pu montrer que la TvPRAC est impliquée chez tous les stades évolutifs de T. Vivax et peut être définie comme facteur de virulence parasitaire, la moitié des souris infectées avec la souche ∆TvPRAC étant capable de contrôler l’infection

  • Titre traduit

    Involvement of proline racemes in the biology of Trypanosoma vivax


  • Résumé

    Trypanosoma vivax is one of the leading parasites responsible for African Animal Trypanosomiasis in Africa and Latin America. Despite its impact, T. Vivax is largely ignored and we deplore the lack of tool for the research on this parasite, such as a robust mouse model or conditions for in vitro culture and transgenesis. We have identified in T. Vivax, the presence of a proline racemase (PRAC), homologous to the TcPRAC, a mitogen and a virulence factor of T. Cruzi discovered and characterized in the laboratory. In this thesis, we describe the development of the tools that allowed us to determine the role of this protein for T. Vivax. We have established a murine model of infection with T. Vivax exhibiting all the major characteristics of affected cattle: the severe anemia, the gross lesions in the liver and spleen and brain edema, the overall leading to the death of the animal. We developed the axenic culture of the epimastigote forms of this parasite, constructed specific vectors for T. Vivax and defined the conditions of transfection to obtain the first T. Vivax genetically modified stably. Remarkably, the transfected parasites are still able to infect immunocompetent mice. The construction of a strain expressing luciferase allowed us to consolidate that T. Vivax is capable of crossing the blood-brain barrier during the late phase of infection. Finally, we inactivated the TvPRAC genes by homologous recombination (ΔTvPRAC) and were able to demonstrate that the TvPRAC is involved in all developmental stages of T. Vivax and can be defined as a parasite virulence factor, half of the mice infected with the ΔTvPRAC strain being capable to control the infection

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  • Détails : 1 vol. (163 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f. 150-163. 216 réf. bibliogr. Index

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