Stratégies d’isolement et de caractérisation des cellules initiatrices de cancer colorectal

par Carole Mélin

Thèse de doctorat en Médecine. Biologie Santé

Sous la direction de Muriel Mathonnet et de Serge Battu.

Soutenue en 2012

à Limoges .


  • Résumé

    Le cancer colorectal (CCR) est le cancer le plus fréquent en Europe et la deuxième cause de décès par cancer dans le monde. Il est caractérisé par sa résistance aux traitements et sa capacité à récidiver suggérant la présence de cellules initiant le cancer (CIC) au sein de la tumeur. Ces cellules sont considérées comme cible majeure pour éradiquer la tumeur mais restent encore mal connues. La principale difficulté reste leur isolement et leur caractérisation afin de développer des thérapies ciblées. Dans ce sens, nous avons développé de nouveaux outils d’isolement et de caractérisation des CIC au sein de lignées humaines de CCR. Le tri cellulaire repose sur la SdFFF qui a permis un enrichissement en CIC à partir d’un panel de lignées. Leur capacité à initier des tumeurs a été testée sur la membrane chorio-allantoïdienne d’embryon de poulet (CAM) ainsi que chez la souris SCID. Le couplage de différentes techniques d’isolement et de caractérisation nous a permis de mettre en évidence différentes sous-populations correspondant à des états de différenciation variables. Nous avons de même amélioré l’outil d’isolement, la SdFFF, par l’implantation d’une lame séparatrice, le « Splitt » qui a favorisé l’élution de ces populations rares sans dilution excessive de celles-ci. Un deuxième outil d’enrichissement en CIC a été le milieu défini d’OncoMid favorisant l’émergence de sphères flottantes ayant les caractéristiques des CIC. Dans ce cadre, la SdFFF a été utilisée pour suivre les modifications biologiques induites, tout comme elle a permis dans une dernière partie de suivre des évènements induits par l’exposition de cellules à des nanotubes de carbone.

  • Titre traduit

    Colorectal cancer initiating cells isolation and characterization strategies


  • Résumé

    Colorectal cancer (CRC) is the most common cancer in Europe and the second leading cause of cancer death worldwide. CRC is characterized by treatment resistance and cancer recurrence suggesting cancer initiating cells (CIC) existence within the tumor. These cells are considered as target for eradicating the tumor but are little known. The main difficulty is CIC isolation and characterization to develop targeted therapies and discover new markers. In this sense, we have developed new tools for isolation and characterization of CIC in human CRC cell lines. The first is based on SdFFF cell sorting which CIC enrichment from a panel of human cell lines of CRC. To further characterize collected populations, capacity to initiate tumors was analyzed onto the chorioallantoic membrane of chick embryo (CAM) and in SCID mice. Coupling different techniques to isolate and characterized CIC permit to identify specific behavior between different subpopulations based on their differentiation state. Parallel optimization of characterization tools, SdFFF was improved by implementing a "Splitt" which promoted the elution of these rare populations without cells excessive dilution. A second tool enrichment CIC has been defined medium OncoMid of encouraging the emergence of floating spheres having CIC characteristics. In this context, SdFFF was used to monitor biological changes induced by this medium, just as it has in the last part of track events induced by exposure of cells to carbon nanotubes.

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  • Détails : 1 vol. (218 f.)
  • Annexes : 217 ref. bibliogr.

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