Recherche de gènes cibles de contaminants de l'environnement génotoxiques après exposition aiguë ou répétée des cellules hépatiques humaines HepaRG

Identificatin of target genes of environmental genotoxic contaminants in human hepatocyte HepaRG cells following acute or reiterated exposures

• Auteur / Autrice : Rozenn Jossé
• Direction : André Guillouzo, Caroline Aninat
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie et sciences de la santé. Pharmacie
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Rennes 1
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Vie-Agro-Santé (Rennes)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université européenne de Bretagne (2007-2016)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Polluants

Mutagènes

Toxicologie cellulaire

Toxicologie génétique

Métabolisme -- Génétique

Cellules hépatiques

Pollution -- Effets physiologiques

Exposition environnementale

Mutagènes

Écotoxicologie

Hépatocytes

Métabolisme

Résumé

La toxicité des substances chimiques est difficile à appréhender chez l'homme, en raison de l'absence de modèle in vitro pertinent, notamment pour l'étude des effets induits par des expositions chroniques à de faibles doses et à des mélanges. Le but de ce travail a été de déterminer si les cellules HepaRG, capables de métaboliser des composés chimiques à des niveaux proches de ceux observés dans des hépatocytes humains en culture primaire, pouvaient répondre à un tel besoin. Nous avons tout d'abord montré que ces cellules restent fonctionnellement stables pendant un mois après l'acquisition de leur état de différenciation et qu'elles permettent la détection de dommages à l'ADN induits par des composés promutagènes, grâce aux tests des comètes et du micronoyau. Nous avons étudié les mécanismes impliqués dans la toxicité de l'aflatoxine B1 et d'amines aromatiques hétérocycliques en mélange; et identifié un gène marqueur d'exposition aux génotoxiques, FHIT.

The lack of relevant in vitro models makes it challenging prediction of toxicity of chemicals in humans, particularly effects induced by reiterated exposure to low concentrations and mixtures. The present work aimed at determining whether human hepatoma HepaRG cells, which are able to metabolize chemicals to levels close to those found in primary human hepatocytes, could bring answers to these challenges. We first showed that these cells maintained their functional capacity for at least one month after differentiation and were suitable for the detection of DNA damage induced by promutagens using the comet and the cytokinesis-block micronucleus assays. Then, we have studied mechanisms involved in AFB1 toxicity and identified FHIT tumor suppressor gene as a potent early biomarker for discriminating between genotoxic and nongenotoxic compounds.