Rôle de la β-TrCPdans la mise au repos du signal transmis par l'érythropoïétine

par Laure Meyer

Thèse de doctorat en Biologie des cellules sanguines

Sous la direction de Frédérique Verdier.

Soutenue en 2010

à Paris 7 .


  • Résumé

    La production régulée des globules rouges nécessite le contrôle de l'intensité et de la durée du signal transmis par l'érythropoietine (Epo) via son récepteur (R-Epo). En réponse à l'Epo, la tyrosine kinase Jak2 est activée ainsi que des relais intracellulaires tels que la voie P13-K, la voie MAPK et la voie impliquant STAT5. Parallèlement à l'activation de ces relais positifs, des relais de mise au repos du signal sont activés impliquant notamment le système ubiquitine-protéasome. Après stimulation par l'Epo, le R-Epo est ubiquitiné par l'E3 ubiquitine ligase β-TrCP et sa partie intracellulaire est dégradée par le protéasome. Après internalisation, le reste du R-Epo est dégradé via les lysosomes. La β-Trcp reconnaît la séquence du R-Epo D-S462-G, Mes travaux ont montré que le recrutement de la β-Trcp au R-Epo est nécessaire pour l'ubiquitination et la dégradation de sa partie intracellulaire par le protéasome et que la mutation du site DSG provoque une prolongation de la signalisation ainsi qu'une hypersensibilité des cellules à l'Epo. De plus, le site DSG est situé dans une région du R-Epo dont la délétion provoque une hypersensibilité à l'Epo et est responsable de certaines formes de polyglobulies familiales. Suite à ces résultats, j'ai étudié le mécanisme de recrutement de la β-TrCP au niveau du R-Epo. Tout d'abord, j'ai montré que seule la S462 est nécessaire pour la liaison de la β-TrCP au R-Epo. Puis, j'ai cherché à identifier la kinase responsable de la phosphorylation de la S462. Les premiers résultats obtenus ont permis d'éliminer les kinases dépendant de l'activation des voies P13-K et Erk. Ainsi, la kinase phosphorylant la S462 du R-Epo est encore inconnue.

  • Titre traduit

    Role of beta-Trcp in the erythropoietin receptor down regulation


  • Résumé

    Control of intensity and duration of erythropoietin (Epo) signaling is necessary to tightly regulate red blood cell production. We have recently shown that the ubiquitin/proteasome System plays a major role in the control of Epo-R signaling. Indeed, after Epo stimulation, Epo-R is ubiquitinated and its intracellular part is degraded by the proteasome, preventing further signal transduction. The remaining part of the receptor is internalized and degraded by the lysosomes. We show that beta-Trcp is responsible for Epo-R ubiquitination and degradation. After Epo stimulation, beta-Trcp binds to the Epo-R. This binding, requires Jak2 activation. The Epo-R contains a typical DSG binding sequence for beta-Trcp. Interestingly, this sequence is located in a region of the Epo-R that is deleted in patients with familial polycythemia. Mutation of the serine residue of this motif to alanine (Epo-RS462A) abolished beta-Trcp binding, Epo-R ubiquitination, and degradation. Epo-RS462A activation was prolonged and BaF3 cells expressing this receptor are hypersensitive to Epo, suggesting that part of the hypersensitivity to Epo in familial polycythemia could be the result of the lack of beta-Trcp recruitment to the Epo-R. In a next step, I studied the mechanism involved in the recruitment of the beta-TrCP. First of all, I showed that only the Ser 462 is involved and necessary for the association between the Epo-R and the beta-TrCP. Then, I tried to find the kinase involved in the S462 phosphorylation. The preliminary results show that the kinase is not dependant of the PI3K and Erk activation. Thus, the kinase responsible of the S462 phosphorylation is not yet known.

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Informations

  • Détails : 1 vol. ([185] f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 455 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2010) 236
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