Mycobacterium abscessus : contribution à l'étude de la paroi et à la résistance aux antibiotiques

par Rachid Nessar

Thèse de doctorat en Analyse de génomes et modélisation moléculaire

Sous la direction de Brigitte Gicquel.

Soutenue en 2010

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Mycobacterium abscessus : contribution to the study of the cell envelope and the resistance to antibiotic


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Dans la première partie de ma thèse nous nous sommes intéressés à l'étude de la résistance de M. Abscessus aux antibiotiques de la famille des aminoglycosides. Nous avons démontré la présence de quatre différentes mutations dans i la partie 3'du gène rrs (T1406A, A1408G, C1409T and G1491T) qui code pour TARN 16S de l'opéron ARNr, et qui est présent en une seule copie chez M. Abscessus. Ces mutations conféraient un niveau élevé de résistance (>1 mg/ml) aux 2 deoxystreptamine aminoglycosides testés (kanamycine, amikacine, gentamycine et tobramycine) mais ne conférait pas de résistance à la streptomycine. Nous avons ensuite démontré le caractère récessif de ces mutations après avoir clone les différents gènes rrs mutés indépendamment dans les quatre positions (T1406A, A1408G, C1409T et G1491T) dans le vecteur réplicatif pNBVl-ZeoR et avoir transformé la souche sauvage de M. Abscessus. Dans un dernier point nous nous somme intéressés à l'étude de coût conféré par ces mutations parraport à la croissance de M. Abscessus, phénomène assez fréquent chez les bactéries multi-résistantes à plusieurs antibiotiques. Nos résultats montrent que dans nos conditions expérimentales les mutations ne conféraient pas de « coût » à la croissance de la bactérie. Dans la deuxième partie de ma thèse, j'ai mis au point un procédé dans le système de mutagénèse utilisé pour la construction de mutants chez M. Abscessus (système de recombineering adapté pour M. Abscessus par Dr Medjahed Halima, et qui a fait l'objet de sa thèse), ce procédé permettait de s'affranchir des isolats spontanés rencontrés. Ces outils m'ont permis de construire un mutant du gène mmpL4b dans la souche isogénique M. Abscessus 390S. Ce gène joue potentiellement un rôle dans le transfert des glycopeptidolipides (GPL) vers la surface cellulaire de la bactérie, la souche mutante M. Abscessus AmmpL4b présente un phénotype rugueux, alors que la souche sauvage possède un phénotype lisse. La complémentation par le gène sauvage mmpL4b restaure le phénotype muqueux de la souche sauvage M. Abscessus 390S(S). Ensuite j'ai montré que la souche M. Abscessus ΔmmpL4b perdait la faculté de se mouvoir par glissement sur milieu solide. Le mutant M. Abscessus ΔmmpL4b ainsi que la souche complémentée ont été utilisées dans le cadre d'une collaboration avec l'équipe de Dr Thomas F Byrd (New-Mexico, USA), cette équipe a montré que le mutant M. Abscessus ΔmmpL4b était incapable de former des biofilmes contrairement à la souche sauvage et à la souche complémentée par le gène sauvage ΔmmpL4b. En outre, cette équipe a démontré le rôle des glycopeptidolipides (GPL) dans la virulence de M. Abscessus au niveau cellulaire. En effet, les résultats obtenus montrent que la souche M. Abscessus ΔmmpL4b (qui produit un taux faible de GPL) pouvait se répliquer dans les macrophages et à stimuler le récepteur toll-like 2 des macrophages (TLR2), alors que les souches sauvage et complémentée n'activaient pas le récepteur TLR2 des macrophages.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (168 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 281réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2010) 192
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 7795
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