Perturbation de la maturation des ARN pré-messagers : biologie et applications thérapeutiques

par Agathe Eckenfelder

Thèse de doctorat en Structure, fonction et ingéniérie des protéines

Sous la direction de Olivier Danos et de Luis Garcia.

Soutenue en 2010

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Alteration of pre-mRNA maturation : biology and therapeutic applications


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    La dystrophie de Duchenne est causée par des mutations du gène codant la dystrophine perturbant souvent le cadre de lecture. L'exclusion d'un exon est possible et mène à la production d'une protéine plus courte mais fonctionnelle. Pour induire un saut d'exon, des séquences antisens ciblant des sites d'épissage du pré-ARNm sont utilisées. Ces séquences peuvent être véhiculées par des snRNA tels que U7 ou Ul qui augmentent leur stabilité, et délivrées en vecteurs viraux pour obtenir une correction à long terme. Nos travaux récents ont démontré que des vecteurs AAV et lentiviraux délivrent efficacement des séquences antisens pour induire un saut d'exon dans le muscle de souris, de chien ou dans des cellules de patients. Ce travail a mené à un essai clinique aujourd'hui en préparation mais se heurte au problème des doses importantes de vecteur à administrer. Plusieurs modifications peuvent être envisagées pour réduire la dose de vecteur, dont une optimisation des niveaux d'expression de UTsnRNA. Nous avons modifié deux cassettes, U7DTex23 et U7ex51AONlongl utilisées pour induire les sauts de l'exon 23 du pré-ARNm dystrophine murin ou de l'exon 51 du pré-ARNm dystrophine humain respectivement. Des cassettes U7 dans lesquelles un activateur muscle-spécifique a été introduit ou basées sur les éléments transcriptionnels de U6 ou 7SK dépendant de la RNAPIII, ont été produites en vecteurs lentiviraux ou AAV2/1. Elles ont été testées dans des myoblastes humains ou par injection intramusculaire de souris mdx. Les résultats montrent que le changement de promoteur ne permet pas d'exprimer U7 alors que l'ajout de l'activateur semble augmenter l'expression de U7 et le saut d'exon.

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Informations

  • Détails : 1 vol. ([144] f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 137 Réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2010) 148
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 7763
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