Rôle du couple Mp1/TPO dans la mise en place de l'hématopoïèse définitive chez l'embryon

Role of Mpl receptor during the establishment of definitive hematopoiesis in the embryo

• Auteur / Autrice : Maud Fleury
• Direction : Michèle Souyri-Caporale
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Thérapeutiques biotechnologiques
• Date : Soutenance en 2010
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récepteurs à la thrombopoïétine

Prolifération cellulaire

Régulation de l'expression des gènes au cours du développement

Embryon de mammifère

Cellules souches hématopoïétiques

Hématopoïèse

Résumé

La thrombopoïétine (TPO), une cytokine isolée comme régulateur principal de la mégacaryopoïèse, joue un rôle important au niveau des cellules souches hématopoïétiques (CSH) adultes, en maintenant leur quiescence in vivo et en favorisant leur survie et leur prolifération in vitro. Nous avons étudié le rôle de la TPO et de son récepteur Mpl au cours du développement. En utilisant le modèle de souris Mpl⁻/ ⁻, nous avons montré que le couple Mpl/TPO intervient à deux moments clés de la mise en place de Phématopoïèse définitive chez l'embryon de souris : au moment de la formation des premières CSH dans la région AGM, et au moment de leur amplification/maturation dans le foie fœtal. En absence de Mpl, les CSH du foie fœtal ne s'amplifient pas et présentent un défaut dans leur capacité d'autorenouvellement Dans la région AGM, le couple Mpl/TPO semble réguler l'amplification des premières CSH en modulant l'expression de facteurs de transcription importants pour l'autorenouvellement (HoxB4), la prolifération (Meisl) et la protection contre l'apoptose (Bel-XL). De plus, il pourrait agir directement sur l'émergence des premières CSH en modulant l'expression de Runxl, principal régulateur de l'émergence des CSH dans la région AGM. Nous avons également étudié le rôle du couple Mpl/TPO dans la régulation des CSH chez l'embryon humain. Nous avons cherché si une population de CSH exprimant Mpl pouvait être isolée dans le foie embryonnaire. Les résultats obtenus ont permis de mettre en évidence l'absence de spécificité des anticorps anti-Mpl commercialisés, invalidant ainsi les conclusions de plusieurs études menées avec ces anticorps sur l'expression de Mpl au niveau des cellules humaines.

Thrombopoietin (TPO), the primary regulator of megacaryopoiesis, plays an important role in adult Hematopoietic Stem Cells (HSC), maintaining their in vivo quiescence and promoting their in vitro survival and proliferation. We studied the role of TPO receptor, Mpl, during murine hematopoietic development. Using the mouse model Mpl⁻/ ⁻, we showed that Mpl/TPO acts at two key moments in the establishment of definitive hematopoiesis: first, in the process of émergence/production of the first HSCs in the AGM region, and then in the amplification and survival/self-renewal of HSCs during their passage in thé fêtai liver. In the absence of Mpl, fetal liver HSCs did not expand and exhibit a defect in their self-renewal ability. In the AGM region, Mpl/TPO appears to regulate the amplification of the first HSCs by modulating the expression of transcription factors important for self-renewal (HOXB4), proliferation (Meisl) and protection against apoptosis (Bel -XL). Moreover, it could act directly on the emergence of the first HSCs by modulating the expression of Runxl, the main regulator of HSC emergence in the AGM region. We also studied the role of Mpl/TPO in the regulation of HSCs in the human embryo. We checked whether a population of HSCs expressing Mpl could be detected in the embryonic liver. The results highlighted the lack of specificity of commercial anti-Mpl antibodies, thus invalidating the conclusions of several studies using these antibodies on the expression of Mpl in human cells.