α-Tubulin nitrotyrosination affects cell growth and is regulated by tubulin tyrosine ligase like 12

par Amit Deshpande

Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Sous la direction de Bohdan Wasylyk.

Soutenue en 2009

à Strasbourg .

  • Titre traduit

    La nitrotyrosination de l'α tubuline affecte la croissance cellulaire et est régulée par TTLL12


  • Résumé

    Les microtubules sont un élément important du cytosquelette et de réaliser une variété de fonctions essentielles.  La diversité fonctionnelle des microtubules provient de différentes diverses - et-tubuline isotypes qui sont exprimés dans la cellule, et une vaste gamme de réversibles modifications post-traductionnelles.  tyrosination Tubulin est l'un de ces modifications exécutées par la tubuline tyrosine ligase (TTL).  TTL est le membre fondateur du 14 tyrosine ligase membres tubuline comme (TTLL) de la famille.  Wasylyk laboratoire a trouvé TTLL12 être exprimés de manière différentielle dans la tête et du cou et le cancer de la prostate.  L'analyse fonctionnelle sur TTLL12 révélé qu'il peut réguler nitrotyrosination tubuline.  Nitrotyrosine - un analogue structural de la tyrosine est présent dans les cellules dans des conditions pathologiques et est incorporé sur le α-tubuline ce qui entrave le fonctionnement normal des microtubules.  nitrotyrosination Tubulin est préjudiciable à la croissance des cellules.  Nous montrons que la surexpression de TTLL12 conduit à diminuer en α-tubuline nitrotyrosination et vice versa.  Nous montrons que nitrotyrosination α-tubuline affecte la croissance cellulaire dans les A549 et cellules HEp-2.  On voit aussi que TTLL12 peut modifier α-tubuline nitrotyrosination et affecter la croissance des cellules Hep-2 et des cellules DU145.  Ainsi TTLL12 pourrait jouer un rôle important dans la régulation de la croissance cellulaire ou la survie des cellules dans les tumeurs avec des niveaux accrus de nitrotyrosine.  Nous avons développé une analyse à haut débit de trouver des composés qui peuvent augmenter nitrotyrosination tubuline par TTLL12, TTL ou d'autres mécanismes.  Le criblage d'une bibliothèque de 10000 composés donné lieu à deux tubes potentiels qui ont augmenté nitrotyrosination tubuline.  Des études plus approfondies de ces visites sur la croissance cellulaire en présence de nitrotyrosine et mécanisme d'action est en cours.


  • Résumé

    Microtubules are an important component of the cytoskeleton and carry out a variety of essential functions. Functional diversity of microtubules comes from various different - and -tubulin isotypes that are expressed within the cell, and an extensive array of reversible post-translational modifications. Tubulin tyrosination is one of such modifications executed by tubulin tyrosine ligase (TTL). TTL is the founding member of 14 member tubulin tyrosine ligase like (TTLL) family. Wasylyk’s laboratory found TTLL12 to be differentially expressed in head and neck cancer and prostate cancer. Functional analysis on TTLL12 revealed that it can regulate tubulin nitrotyrosination. Nitrotyrosine - a structural analogue of tyrosine is present in cells in pathological conditions and is incorporated on the α-tubulin thus hampering the normal functioning of microtubules. Tubulin nitrotyrosination is detrimental to cell growth. We show that over expression of TTLL12 leads to decrease in α-tubulin nitrotyrosination and vice versa. We show that α-tubulin nitrotyrosination affects cell growth in A549 and HEp-2 cells. We further show that TTLL12 can alter α-tubulin nitrotyrosination and affect the cell growth in HEp-2 and DU145 cells. Thus TTLL12 could play an important role in the regulation of cell growth or cell survival in tumors with increased levels of nitrotyrosine. We developed a high throughput assay to find compounds which can increase tubulin nitrotyrosination via TTLL12, TTL or other mechanisms. Screening a library of 10000 compounds resulted in two potential hits which increased tubulin nitrotyrosination. Further investigations of these hits on cell growth in the presence of nitrotyrosine and mechanism of action is in progress.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (141 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 120-139

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2009;0436
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