Activation différentielle des voies de signalisation des MAP KINASES dépendantes des récepteurs Toll-Like au cours de l'ischémie-reperfusion rénale

par Sanae Ben Mkaddem

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire, physiologie et pathologie

Sous la direction de Alain Vandewalle.

Soutenue en 2009

à Paris 7 .


  • Résumé

    L'ischémie-reperfusion (1/R) rénale est responsable d'une réponse inflammatoire et d'une apoptose des cellules tubulaires rénales pouvant induire des lésions rénales parfois sévères. Les récepteurs Toll-like (TLR), particulièrement TLR2 et TLR4, jouent un rôle clé dans l'induction de la réponse inflammatoire des cellules tubulaires ischémiées. Cependant, les mécanismes de régulation des voies de signalisation dépendantes de TLR2 et/ou TLR4 restent encore mal très connus. Dans ce travail, nous avons analysé le rôle de TLR2 et TLR4 dans l'activation des voies de signalisation dans des reins de souris sauvages (WT) et invalidées pour TLR2 et TLR4, soumises à une I/R transitoire et dans des cultures primaires de cellules tubulaires rénales (RTEC) rendues hypoxiques. L'I/R rénale induit la phosphorylation de ERK1/2 dans les RTEC sauvages et invalidées pour TLR4, mais pas dans les RTEC déficientes en TLR2, suggérant que seul TLR2 régule la phosphorylation de ERK1/2 au cours de l'I/R rénale. De plus, l'invalidation de la protéine phosphatase 5 (PP5) et de la gp96 restaure la phosphorylation de ERK1/2 dans les cellules T1r2J , indiquant que l'induction de ERK1/2 est essentiellement dépendante de TLR2 via PP5 et la gp96 au cours de l'I/R rénale. L'I/R rénale induit aussi l'activation d'une isoforme de 28 kDa de la NAD(P)H oxydase non phagocytaire 4 (NOX4) qui régule la réponse inflammatoire dépendante de TLR4 ainsi que l'activation de l'apoptose. L'inactivation de NOX4 prévient l'activation dépendante de TLR4 de la voie pro-apoptotique ASK1-JNK. L'ensemble de ces résultats indique que l'I/R induit une activation sélective et distincte de certaines des voies de signalisation par le biais des interactions du complexe TLR/gp96 avec des protéines clientes impliquées dans l'activation de l' apoptose des cellules tubulaires rénales.


  • Résumé

    Ischemia/reperfusion (I/R) injury induces potent inflammatory response and tissue damage that may lead to renal insufficiency. Among Toll-like receptors TLR2 and TLR4 play key roles in the pathogenesis of ischemic inflammatory responses. However, the regulatory mechanisms of TLR2- and TLR4-mediated signaling pathways involved in the control cell survival, inflammatory responses and cell apoptosis still remain elusive. Here we analyze the role of TLR2- and TLR4-mediated signaling pathways using wild-type (WT) and TLR2- or TLR4-deficient mite subjected to transient I/RI and post-hypoxic primary cultures of renal tubule epithelial tells (RTECs). I/R injury induced the phosphorylation of ERK1/2 in wild type and 171-4-/- RTECs but not in T1r2-/- RTECs, indicating that TLR2 selectively mediates the activation of ERK1/2 during hypoxia. Silencing of the chaperone heat shock protein gp96 restored the phosphorylation of ERK1/2 in T1r21- RTECs via the inhibition of phosphatase protein 5 (PP5). Renal I/R also stimulated a non-phagocytic NAD(P)H oxidase 4 (NOX4) isoform of 28 kDa which acts as a sensor of the TLR4-mediated cell apoptosis. Inactivation of NOX4 prevented TLR4-dependent activation of the apoptosis signaling-regulating kinase 1 (ASK1), JNK proapoptotic pathway. Overall, these findings indicate that I/R induces selective activation of distinct TLR-mediated pathways via the interaction of the TLR/gp96 complex with distinct protein clients involved in the induction of renal tubule cell apoptosis.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (170 f.)
  • Annexes : Réf. bibliogr. f.136-154. Annexes

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Consultable sur place dans l'établissement demandeur
  • Cote : TS (2009) 263
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.