Rôle de la protéine EWS dans les effets de p53 sur la transcription et l'épissage

par Jérôme Barbier

Thèse de doctorat en Bases fondamentales de l'oncogénèse

Sous la direction de Didier Auboeuf.

Soutenue en 2009

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Role of EWS protein in p53 effects on transcription and splicing


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Les cellules sont soumises à différents stress notamment les stress génotoxiques qui peuvent entraîner des mutations de l'ADN. Les cellules détectent et répondent à ces stress grâce à Pactivatior d'effecteurs. Un des effecteurs essentiel est la protéine p53. Ce facteur de transcription module l'expression de gènes impliqués dans des fonctions variées composant la réponse cellulaire, notamment lors de stress génotoxique. Par ailleurs, l'utilisation d'inducteurs de stress génotoxique se révèle intéressante en chimiothérapie car ces inducteurs peuvent induire la mort des cellules tumorales. Cependant, leur utilisation provoque des effets secondaires et des phénomènes de résistance. L'étude de la réponse cellulaire aux stress génotoxiques est donc un enjeu important en cancérologie. L'objectif de ma thèse a été d'étudier les mécanismes moléculaires mis enjeu lors de la modulation de l'expression des gènes durant un stress génotoxique et/ou lors de l'activation de la protéine p53. J'ai tout d'abord étudié la régulation de l'expression d'un gène cible de p53 en réponse à un stress génotoxique, la camptothécine (CPT), en me focalisant sur le gène H-ras qui est un des proto-oncogènes les plus mutés ou sur-exprimés dans les cancers. Ce gène génère deux transcrits contenant ou pas l'exon 5. J'ai montré que le transcrit ayant l'exon 5 porteur d'un codon STOP prémature est dégradé par le Nonsense Mediated Decay (NMD) et que sa production est stimulée pai la CPT de façon p53-dépendante. Mes travaux indiquent qu'un stress génotoxique conduit à la synthèse d'un transcrit H-ras non traduit, dégradé par le NMD et que p53 modifie à la fois l'activité transcriptionnelle du gène H-ras mais aussi l'épissage de ses produits. Les facteurs de transcription peuvent affecter l'épissage des produits de leurs gènes cibles en recrutant des corégulateurs transcriptionnels impliqués à la fois dans la transcription et dans l'épissage. Je me suis intéressé à plusieurs corégulateurs susceptibles d'être impliqués dans les effets de p53. Parmi ceux-là, j'ai constaté qu'EWS est requis pour l'effet de p53 sur les variants d'épissage de H-ras. Cela m'a condui à tester le rôle d'EWS dans l'effet transcriptionnel de p53 à large échelle grâce à une analyse basée sur des puces à ADN. Mes résultats indiquent qu'EWS est nécessaire à l'activition transcriptionnelle d'un grand nombre de gènes cibles de p53. En termes de mécanisme, j'ai montré qu'EWS est nécessaire pour le recrutement optimal de l'ARN Polymérase II sur des gènes cibles de p53 et de façon plus importante, j'ai observé qu'EWS est surtout requis pour une liaison efficace de p53 sur ses éléments de réponse. EWS, qui a été purifié dans le complexe TFIID, a des effets similaires à TAF1, une sous-unité de TFIID, qui est impliquée dans les effets de p53. Dans Pensemfble, mes résultats montrent que la CPT via p53 altère l'activité transcriptionnelle du gène H-ras et l'épissage de ses produits et qu'EWS participe aux effets de p53. En conclusion, ce travail ouvre de nouvelles hypothèses dans la compréhension de la réponse cellulaire aux stress car le NMD pourrait être un nouveau mécanisme de régulation de l'expression des gènes en limitant la production de transcrits potentiellement mutés induits par un stress génotoxique. Par ailleurs, l'identification d'EWS comme un nouvel acteur des effets de p53 pourrait ouvrir de nouvelles perspectives dans l'étude de la réponse cellulaire aux stress dans les sarcomes où le gène EWS est souvent altéré.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (173 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 262 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2009) 173
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 8399
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