Etude des fonctions de la spectrine α non érythroide

Study of the non erythroid α spectrin functions

• Auteur / Autrice : Sylvain Metral
• Direction : Marie-Christine Lecomte
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Structure, fonction et ingéniérie des protéines
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Paris 7

Mots clés

Mots clés contrôlés

Apoptose

Lignée cellulaire tumorale

Petit ARN interférent

Adhérence cellulaire

Spectrine

Cycle cellulaire

Résumé

Le squelette dépendant de la spectrine, localisé sous la bicouche lipidique, est un échafaudage essentiel de toutes les cellules animales. La Spectrine (Sp), structure géante, robuste mais flexible d'hétéro tétramères (αβ)2, constitue les filaments de ce réseau, dont chaque nœud interagit avec des filaments d'actine. Les fonctions du squelette de Sp, qui sont bien définies dans le globule rouge (rôle dans sa forme, dans sa résistance aux forces de cisaillement et dans sa déformabilité) sont moins bien connues dans les cellules non-érythroïdes. La Sp non-érythroïde pourrait participer à l'établissement et/ou au maintient de sous-domaines membranaires spécialisés dans l'accumulation de protéines de membrane (telles que les canaux ioniques, les pompes ioniques, les récepteurs et les molécules d'adhérence) comme nous le fait penser les invalidations de la Sp-β non-érythroïde. Cependant le rôle de la Sp-a non-érythroïde est moins bien établi. Chez les mammifères, la Sp-α est codée par deux gènes: un pour Sp-αl, principalement exprimée dans l'érythrocyte mature, le second pour Sp-αI qui est exprimée dans toutes les cellules nucléées. Pour étudier les fonctions de la Sp-αll, nous avons utilisé une approche de SiRNA sur des cellules de mélanome humain. Nos données montrent que la diminution de Sp-αll est associée à I) un arrêt en G1 du cycle cellulaire II) une perte d'adhérence des cellules malgré l'augmentation de quelques intégrines III) des modifications dans l'organisation du réseau d'actine.

The spectrin-based skeleton is an essential scaffold underlying different lipid bilayers in ail animal cells. Spectrins (Sp), as giant extended flexible heterotetramers (aβ)2, constitute the filaments of this network, the nodes of which are cross-linked by actin filaments. The functions of the Sp-based skeleton, which are well defined in red blood cells (required for shape, résistance to shear stress and deformability) are less well understood in non-erythroid cells. The non-erythroid Sp might participate in the establishment and/or the maintenance of specialized membrane subdomains by accumulating integral membrane proteins (such as ionic channels, ionic pumps, receptors and cell adhesion molecules) as revealed by loss of the main non-erythroid β-Sp. However the effect of non-erythroid α-Sp are less well established. In mammals, α-Sp are encoded by two genes: one for al-Sp mainly expressed in mature erythrocyte, the second one for αll-Sp which is expressed in ail nucleated cells. Ln the pursuit of all-Sp functions, we have checked the effect of αll-Sp knock down by siRNA melanoma human cell line. Our data revealed that spectrin depletion is associated with i) an arrest of cell cycle at G1 state ii) a loss of cell adhesion in spite of increase in some integrins iii) some modifications of actin organisation.