Laboratoires-sur-puce pour l'analyse cellulaire : tri de cellules tumorales circulantes et culture de neurones

par Laure Saias

Thèse de doctorat en Physicochimie

Sous la direction de Jean-Louis Viovy.

Soutenue en 2009

à Paris 6 .

  • Titre traduit

    Lab-on-chip for the cell analysis : sorting of circulating tumor cells and culture of neurones


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  • Résumé

    Nous présentons deux dispositifs microfluidiques dédiés à l’analyse cellulaire. Le premier système est dédié à la caractérisation de Cellules Tumorales Circulantes (CTC) dans l’objectif de permettre une meilleure prise en charge d’un patient ayant développé un cancer (pronostic, orientation du traitement le plus adapté). Afin de permettre l’analyse d’un prélèvement sanguin à haut débit, l’architecture des canaux d’un nouveau système microfluidique a été optimisée grâce à des simulations fluidiques avec le logiciel COMSOL. Les cellules sont capturées dans le microsystème par un réseau de colonnes constituées de billes magnétiques fonctionnalisées avec des anticorps dirigés spécifiquement contre une protéine membranaire exprimée par les CTC (en particulier dans les cas de cancer du sein), EpCAM (Epithelial Cell Adhesion Molecule). Ce réseau de colonnes a été stabilisé en réalisant un ancrage magnétique par assemblage capillaire. Les capacités de capture du système ont été évaluées grâce à des échantillons cellulaires modèles (lignées cellulaires, sang de donneurs sains). Une fois les cellules immobilisées sur les colonnes, l’expression de protéines spécifiques (cytokératine, CD45) peut être caractérisée par marquages immunofluorescents en imagerie confocale haute résolution. Le deuxième système microfluidique a été développé afin de pouvoir reconstruire des réseaux neuronaux dirigés. Une géométrie innovante de microcanaux a permis l’élaboration de diodes axonales. L’aptitude du système à structurer les connexions entre neurones a été évaluée avec des neurones primaires. Plusieurs types de réseaux ont ainsi été reconstruits et maintenus en culture sur 12 jours.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (201 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 191-201. 174 réf. bibliogr.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
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  • Cote : T Paris 6 2009 684
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