Flippase, tension mécanique et mécanosensibilité

par Pierre Ezanno

Thèse de doctorat en Biophysique moléculaire

Sous la direction de Philippe F Devaux.

Soutenue en 2009

à Paris 6 .


  • Résumé

    Membranaires ou solubles, les protéines sont sensibles à leur environnement. La tension mécanique latérale de membrane via les lipides est un paramètre physico-chimique de l’environnement des protéines membranaires. La flippase (une protéine membranaire) peut moduler cette tension en créant une asymétrie de population des lipides entre les deux feuillets d’une membrane. La flippase des érythrocytes (ATPase dépendante du Mg ATP) est, dans cette thèse, utilisée non purifiée : à partir de sa membrane native. Une protéine membranaire mécanosensible change de conformation en fonction de la tension mécanique dans la membrane. Le MscL (Mechano sensitive channel Large conductance) en est un exemple. La flippase reste active dans les systèmes membranaires géants utilisés, malgré une étape de déshydratation partielle de la membrane (étape nécessaire à la formation de liposomes géants). Un ajout de Mg ATP déclenche l’activité flippase qui est détectée par un changement de forme de liposomes. Ensuite, la tension mécanique latérale a été déclenchée dans une membrane qui contient la flippase et aussi le MscL dont le changement de conformation est observé en électrophysiologie. En présence d’activité flippase, le comportement du MscL est modifié : la tension requise d’ouverture semble plus basse.

  • Titre traduit

    Flippase, mechanical tension and mechanosensitivity


  • Résumé

    Membrane proteins and soluble proteins are sensitive to their environment. The lateral mechanical tension in membrane via lipids is a physico-chemical parameter of membrane protein environment. The flippase (a membrane protein) can modulate this tension creating an asymmetry of lipids populations between both of membrane leaflets. Flippase from erythrocytes (a Mg ATP dependent ATPase) is, in this thesis, used unpurified: from its native membrane. A mechanosensitive membrane protein changes conformation according to the mechanical tension in the membrane; for example, the MscL (Mechano sensitive channel Large conductance). The flippase is still active in giant membrane systems used, despite a partial dehydration step of membrane (required step in making giant liposomes). An addition of MG ATP triggers the flippase activity which is detected by liposome shape changes. Then, the lateral mechanical tension is triggered in a membrane containing the flippase and the MscL the opening of which is monitored by electrophysiology. In the presence of flippase activity, the MscL’s behaviour is modified: the required tension to open the channel seems to be lowered.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (214 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 189-201. 139 réf. bibliogr.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
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  • Cote : T Paris 6 2009 167
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