Identification of noval critical steps in the early and late Fas signaling pathway : the role of Fas tyrosine phosphorylation and the formation of Fas complexes

par Eszter Doma

Thèse de doctorat en Biologie cellulaire et moléculaire

Sous la direction de Anne-Odile Hueber.

  • Titre traduit

    Identification de nouvelles étapes critiques dans les phases précoces et tardives de la signalisation par Fas : rôle de la phosphorylation des tyrosines et formation de complexes de Fas


  • Résumé

    Fas is a prototypic death receptor of the tumor necrosis factor receptor (TNFR) superfamily. It is constitutively expressed in a wide range of tissues and plays a particularly important role in the lymphocyte homeostasis. Upon engagement by its ligand (FastL), it undergoes rapid internalization, whereupon the adapter FADD and the caspase-8 proenzyme are recruited to form the death-inducing signalling complex (DISC), leading to caspase activation and cell death. Accumulating evidence suggests that Fas, besides being a death-inducing receptor, can also mediate a variety of non-death activities. However the precise molecular mechanism of the divergence of these two pathways is not fully understood. This thesis is focused on two different aspects of the Fas signalling in order to gain deeper in sight in its precise regulation. We found that the intracellular tyrosines of Fas are located in important phosphorylation and internalization sorting motives, and therefore focused on the role of the receptor tyrosine phosphorylation. We show that the two tyrosine residues are critical for Fas mediated cell death. However they have different phosphorylation pattern and adaptor recruitments. As important regulators of internalization and downstream signalling, Fas tyrosine phosphorylation pattern might be one of the early events which are responsible for the bifurcation of the cell death and survival pathways. At the execution phase of FasL-induced apoptosis we noticed the formation of distinct SDS-stable Fas complexes. This complex formation occurs downstream of the DISC assembly and requires distinct caspase activities. Subgroup of Fas complexes differ in the requirement for the integrity of actin and microtubular cytoskeleton. Consequently, we identified a novel role of microtubule in the organization of Fas molecules during apoptosis. Altogether, the findings reveal some new steps in the very early and late stages of Fas signalling which contribute to the understanding of its functional versatility.


  • Résumé

    Fas est un récepteur de mort de la superfamille des récepteurs au TNF (TNFR). Il est exprimé constitutivement dans de nombreux tissus et joue un rôle important dans l’homéostasie lymphocytaire. Suite à la liaison de son ligand (FasL), il est rapidement internalisé puis recrute les protéines FADD et procaspase-8 pour former le DISC (death-inducing signaling complex), conduisant ainsi à l’activation des caspases et la mort de la cellule. De nombreux travaux suggèrent que Fas, en plus d’être un récepteur de mort, peut transmettre des fonctions alternatives ou de survie. Or, le mécanisme moléculaire contrôlant l’orientation de la signalisation vers ces fonctions n’est pas élucidé. Cette thèse est focalisée sur deux aspects différents de la signalisation par Fas afin de préciser ses mécanismes de régulation. Deux tyrosines intracellulaires de Fas sont localisées dans des motifs importants pour la phosphorylation et l’internalisation. Nous avons démontré que ces deux résidus ont un rôle critique dans la mort induite par Fas. Cependant, ils ont profil de phosphorylation différent et recrutent différents adaptateurs ? Ainsi, comme d’autres importants régulateurs de la signalisation de Fas, son profil de phosphorylation pourrait représenter un des événements précoces responsable de la bifurcation du signal vers des voies de mort ou de survie. Pendant la phase d’exécution de la mort par Fas, nous avons observé la formation de différents complexes de Fas stables en présence de SDS. Ceci a lieu en aval du DISC et nécessite l’activité des caspases. Ces complexes diffèrent entre eux quant à la nécessité d’un cytosquelette d’actine et microtubulaire intègre pour leur formation. Ainsi, nous avons identifié un nouveau rôle des microtubules dans l’organisation des molécules de Fas pendant l’apoptose. L’ensemble de ces résultats a é=révélé certaines nouvelles étapes dans les phases très précoces et tardives de la signalisation par Fas et qui contribuent à la compréhension de la versatilité fonctionnelle de Fas.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (165 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 143-165. Résumés en français et en anglais

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Nice Sophia Antipolis. Service commun de la documentation. Bibliothèque Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : 09NICE4078
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.