Association des glycoprotéines du Virus de l'Hépatite C et des apoB lipoprotéines : Vers un modèle de biosynthèse des lipo-viro-particules

par Vinca Domenach Icard

Thèse de doctorat en Sciences de la vie

Sous la direction de Patrice André.


  • Résumé

    La densité des particules du virus de lhépatite C circulant dans le sang des patients infectés est très hétérogène. La densité très légère de certaines particules est liée à l'association du virus aux apoB lipoprotéines riches en triglycérides (TRL), formant une lipoprotéine hybride appelée lipo-viro-particule (LVP), contenant les glycoprotéines d'enveloppes virales E1 et E2, la capside et l'ARN viral. L'infectivité spécifique de ces particules légères est supérieure à celle des particules de plus forte densité. Le rôle des apolipoprotéines dans la synthèse et l'assemblage des particules virales est inconnu. Les cellules Caco-2 se différentient in vitro en enterocytes sécrétant de l'apoB dans des conditions particulières de culture. Après différentiation, les cellules exprimant E1 et E2 de manière stable sécrètent ces dernières de façon concomitante à la sécrétion des TRL. Elles sont détectées uniquement dans les fractions de densité contenant l'apoB et celle-ci peut être co-immunoprécipitée avec des anticorps anti-E2. Cette association avec l'apoB est aussi visualisée en microscopie électronique. La sécrétion de E1 et E2 est réduite lorsqu'on inhibe la production des TRL. E1 et E2 sont sécrétées en association avec les TRL aussi dans la lignée HepG2, mais pas dans les lignées d'hépatome Huh-7 et Huh-7. 5 qui s'avèrent déficientes dans l'assemblage des lipoprotéines. E1 et E2 ont donc la capacité intrinsèque d'utiliser la machinerie d'assemblage des lipoprotéines. Un modèle d'assemblage des LVP est proposé. Les particules produites par les Caco-2 sont capables de fusionner avec des liposomes de manière dose et pH dépendante, mais pas celles produites par les Huh-7. 5.

  • Titre traduit

    Association of Hepatitis C Virus envelope glycoproteins and apolipoprotein B positive lipoproteins : towards a model of lipo-viro-particles assembly


  • Résumé

    The density of circulating hepatitis C virus particles in the blood of chronically infected patients is very heterogeneous. The very low density of some particles is linked to an association of the virus with apolipoprotein B (apoB) positive and triglyceride rich lipoproteins (TRL), resulting in hybrid lipoproteins known as lipo-viro-particles (LVP) containing the viral envelope glycoproteins E1 and E2, capsid and viral RNA. The specific infectivity of these particles has been shown to be higher than the infectivity of particles of higher density. The role of apolipoproteins in the synthesis and assembly of the viral particles is unknown? The intestinal Caco-2 cell line diferentiates in vitro into enterocyte in special conditions o culture. After one week of differentiation, Caco-2 cells stably expressing E1 and E2 secreted E1 and E2 concomitantly with TRL secretion. Secreted E1 and E2 were only detected in apoB containing density fractions. ApoB could be co-immunoprecipitated with E2-specific antibodies. ApoB and E2 association on TRL surface is also confirmed by immuno-gold labeling by using electron microscopy. E1 and E2 secretion was reduced by inhibiting the secretion of TRL. E1 and E2 were similary secreted in association with TRL from the human liver cell line HepG2 but not by Huh-7 and Huh-7. 5 hepatoma cells that proved deficient for lipoprotein assembly. E1 and E2 have thus the intrinsic capacity to utilize apoB synthesis and lipoprotein assembly machinery. A model for LVP assembly is proposed. The particles secreted by Caco-2 cells are able to fuse with liposomes in a dose and pH dependent way, whereas the particles secreted by Huh-7. 5 cells are not.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (139 f.)
  • Annexes : Bibliogr. p.120-129

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Bibliothèque Diderot Sciences (Lyon).
  • Disponible pour le PEB
  • Bibliothèque : Bibliothèque Diderot Sciences (Lyon).
  • Non disponible pour le PEB
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.