Développement de modèles de cancer par xénotransplantation chez le poisson zèbre

Cancer models development by xenotransplantation in zebrafish

• Auteur / Autrice : Benoist Pruvot
• Direction : Johanna Chluba
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie. Biologie moléculaire et cellulaire
• Date : Soutenance en 2009
• Etablissement(s) : Dijon

Mots clés

Mots clés contrôlés

Hétérogreffes

Transplantation hétérologue

Expérimentation animale

Danio rerio

Mots clés libres

Poisson zèbre

Résumé

L'utilisation de modèles animaux a permis la découverte de mécanismes importants du développement tumoral et la mise au point de nouveaux traitements. Le poisson zèbre (Danio rerio), est de plus en plus utilisé dans le cadre de ces recherches du fait de ses nombreux avantages comme la transparence de ses larves. Des approches par transplantation de cellules tumorales de mammifères se sont développées récemment chez ce téléostéen. Elles permettent d’étudier le devenir des cellules injectées et leurs réponses aux traitements en tenant compte des interactions entre cellules cancéreuses et leur environnement. Dans ce contexte, nous avons mis au point des modèles de leucémies par transplantation de cellules de lignées humaines et validé la pertinence de ces modèles dans des études pharmacologiques. Une seconde approche, basée sur la transplantation de cellules leucémiques primaires de patients a permis une caractérisation des cellules susceptibles de coloniser les larves de poisson. Le monoxyde d’azote (NO) semble jouer un rôle ambivalent dans le développement tumoral. Nous avons développé un nouveau modèle in vivo afin de mieux comprendre l’origine et les conséquences de la production de NO dans l’environnement tumoral. L’utilisation de diaminofluorophores dans un modèle de xénotransplantation de gliomes de rat nous a permis de mettre en évidence une production de NO in situ dans l’environnement tumoral. Enfin, la possibilité de suivre le développement de cellules cancéreuses in vivo d’étudier des protéines potentiellement impliquées dans la progression tumorale. Nous avons caractérisé une famille de protéines susceptibles d’intervenir dans ce processus : les nonaspanines.

New cancer model development allowed new approach to understand important mechanisms involved in tumour progression and to develop new treatments. Due to its advantages, such as embryos transparency, zebrafish (Danio rerio) is more and more used in biological experimentation, and recently in cancer research. By transplanting mammalian tumour cells in zebrafish larvae, several models have been obtained. Such models allowed cancer cells development and response to several treatment , considering cancer cells and tumour interactions. We developed leukaemia models based on human cell lines transplantations. We also validated our models in pharmacological assays. Another model was obtain by injecting human leukaemia primary cells extract from patient blood and allowed us to define leukaemia cell fraction that can colonize zebrafish larvae. Nitric oxide (NO) involvement during tumour progression is ambivalent and still discussed. We developed a new in vivo model to analyse nitric oxide production and roles in tumour environment by using diaminofluorophores in a rat glioma xenograft model. By following tumour cell in vivo, we are able to study proteins that may be involved in tumour progression. We characterized a protein family called nonaspanins.