Caractérisation cellulaire et moléculaire de la spermatogenèse chez l’huître creuse Crassostrea gigas : Thèse soutenue sur un ensemble de travaux

par Alban Franco

Thèse de doctorat en Physiologie. Biologie des organismes, populations, interactions

Sous la direction de Michel Mathieu.

Soutenue en 2009

à Caen .


  • Résumé

    L’huître creuse Crassostrea gigas est un mollusque bivalve dont le cycle de reproduction est annuel. Les acteurs cellulaires et les facteurs moléculaires qui interviennent dans les événements précoces de la spermatogenèse restent méconnus. La gonade d’huître est formée de tubules gonadiques imbriqués dans un tissu conjonctif de réserve. Ces tubules sont constitués de cellules myoépithéliales bordées d’une matrice acellulaire. La lignée germinale mâle se développe, au sein de ces tubules, entourée de cellules somatiques intratubulaires. Deux types de spermatogonies ont été caractérisés : les spermatogonies I, isolées et proches de la matrice acellulaire, présentent des caractéristiques de cellules précoces et prolifèrent durant les premiers stades de la spermatogenèse. Les spermatogonies II, groupées et reliées par des ponts cytoplasmiques, se divisent tout au long du cycle de reproduction. Les données morphologiques ont permis de valider des fractions cellulaires obtenues après séparation sur gradient de densité. L’analyse de la ploïdie et du mitochondriome des cellules permet de mettre en évidence des populations cellulaires différentes dans ces fractions. Sur la base de l’activité mitochondriale, un tri cellulaire de cellules pouvant correspondre aux spermatogonies/spermatocytes primaires et spermatides a été réalisé. Au sein du tubule, les cellules somatiques intratubulaires ont certainement un rôle majeur dans la régulation de la spermatogenèse. Par la technique de microdissection laser une expression forte de facteurs de la famille des TGF-beta, Cg-mGDF et Cg-Gbb est mesurée au stade III, et localisée par HIS dans ces cellules somatiques intratubulaires.

  • Titre traduit

    Cellular and molecular characterization of the early stages of the spermatogenesis in the Pacific oyster Crassostrea gigas


  • Résumé

    The pacific oyster Crassostrea gigas is a bivalve mollusc with annual reproductive cycle. Cellular and molecular factors of regulation of the early stages of spermatogenesis stay unknown. Oyster gonad is formed by gonadal tubules invaginated in a connective storage tissue. Myoepithelial cells surround gonadal tubules and are associated with a large matrix delimiting the outer part of the tubule. The inner part is composed by intragonadal somatic cells associated with germinal lineage. Two types of spermatogonia are characterised: spermatogonia type I, isolated and leaned against the base of the tubule, proliferate only at the first stages of spermatogenesis. In opposite, type II spermatogonia are clustered and proliferate all along the reproductive cycle. Populations of germ cells separated on density gradient were validated on the basis of ultrastrutural characteristics. The determination of ploidy and mitochondrium staining of the cells allow to determine several populations in each gradient fraction. First attempt of cell sorting after mitochondrium staining leaded to the isolation of spermatids and spermatocytes/spermatogonia. In gonadal tubules, somatic intratubular cells probably play an important part in the regulation of the spermatogenesis. The expression of Cg-mGDF and Cg- GBB, two members of TGF-beta family, was measured in microdissected tissues. The two factors were strongly expressed at stage III of the reproductive cycle. Localisation of the expression of Cg-mGDF was performed by in situ hybridization and immunochemistry. Cg-mGDF seems to be expressed exclusively in somatic intratubular cells in the Pacific oyster.

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  • Détails : 1 vol. (230 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p.199-230

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  • Bibliothèque : Université de Caen Normandie. Bibliothèque universitaire Sciences - STAPS.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TCAS-2009-62
  • Bibliothèque : Université de Caen Normandie. Bibliothèque universitaire Sciences - STAPS.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TCAS-2009-62bis
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