Etude du contrôle de la traduction des isoformes du VEFG-A

par Amandine Bastide

Thèse de doctorat en Physiopathologie cellulaire, moléculaire, et intégrée

Sous la direction de Hervé Prats et de Christian Touriol.

Soutenue en 2008

à Toulouse 3 .


  • Résumé

    Le VEGF A est un facteur angiogénique majeur intervenant dans l'angiogenèse physiologique et pathologique. Son expression est régulée à toutes les étapes de l'expression génique. . Le pré-ARNm est soumis à un épissage alternatif qui permet la synthèse de trois isoformes majeures de 121, 165 et 189 acides aminés. L'ARNm du VEGF A possède deux sites d'entrée interne des ribosomes (IRES) et deux codons alternatifs d'initiation de la traduction. L'initiation de la traduction au codon AUG, sous le contrôle de l'IRES A, entraîne la synthèse de VEGF A sécrété. Le codon CUG, sous le contrôle de l'IRES B, est responsable de la synthèse du L-VEGF. Cette isoforme est maturée par clivage pour générer une molécule de VEGF A sécrétée et un fragment amino-terminal intracellulaire (le N-VEGF). Nous avons voulu identifier par quel mécanisme la séquence exonique du VEGF, issue de l'épissage alternatif, contrôle l'initiation de la traduction. Nous avons mis en évidence une séquence en amont de l'AUG impliquée dans cette régulation. Cette séquence contenant une uORF, nous avons examiné l'effet de sa traduction sur l'expression du VEGF et le mécanisme de traduction de cette uORF. Nos résultats montrent que cette uORF est fonctionnelle et qu'elle est impliquée dans la régulation de l'expression des isoformes du VEGF. Cette uORF est traduite par un mécanisme indépendant de la coiffe et inhibe la synthèse de l'isoforme 121 dans des conditions environnementales non-hypoxiques. L'ensemble de cette étude permet de mieux comprendre les mécanismes de synthèse des différentes isoformes du VEGF dans des processus pathologiques.

  • Titre traduit

    Study of VEGF-A isoforms translational control


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    VEGF A is a major angiogenic factor, which is implicated in both physiologic and pathologic angiogenesis. Regulation of VEGF A expression occurs at multiple levels of gene expression. Alternative splicing of the pre-mRNA gives rise to three major isoforms of 121, 165 and 189 amino acids. The VEGF mRNA contains two internal ribosome entry sites (IRES) and two alternative initiation codons. The IRES A controls the initiation of the translation at the AUG codon, and the upstream IRES B directs the alternative initiation at the in frame CUG codon, generated a high molecular weight VEGF isoform (L-VEGF). The L-VEGF cleavage generates secreted VEGF and an intracellular fragment, the N-VEGF. We first demonstrated that VEGF IRESs are activated in vivo under environmental stress conditions such as hypoxia, in a mice model of hindlimb ischemia. Morever, we try to identify how the exon content of the VEGF mRNA, determined through alternative splicing, controls the alternative translation initiation. We have determined that this regulation seems occurs in a sequence upstream from the AUG. Since this region contains an upstream open reading frame (uORF), we have examined the involvement of its translation. Our results suggest that this uORF is functional and is involved in alternative translation initiation of the VEGF A isoforms. This uORF can be translated by a cap independent mechanism and leads to the inhibition of VEGF 121 isoform in non-hypoxic environmental condition. These data highlight new regulatory element and provide a framework for understanding the regulation mechanism of VEGF isoforms implicated in pathological condition.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (207 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 181-207

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 2008TOU30173
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